其他(电容型场效应生物传感器) 2009

Penicillin biosensor based on a capacitive field-effect structure functionalized with a dendrimer/carbon nanotube multilayer.

Biosensors & bioelectronics Siqueira JR, Abouzar MH, Poghossian A, Zucolotto V, Oliveira ON, Schöning MJ
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组成图示

Penicillin biosensor based on a capac... 传感器构成示意图

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传感器类型

其他(电容型场效应生物传感器)

检测对象

青霉素 G(penicillin G,benzyl penicillin);样品基质:pH 8 polymix 缓冲液(含 0.1 M KCl)

检测原理

该传感器以电容型 EIS 结构为换能器。青霉素 G 进入溶液后,被吸附固定的青霉素酶识别并催化水解为青霉酸,同时释放 H+。PAMAM/SWNT 逐层组装膜具有纳米多孔结构,可促进 H+ 快速渗透至 Ta2O5 表面,同时增加酶负载并限制缓冲分子对 H+ 的补偿。H+ 在 Ta2O5/溶液界面改变表面电荷,调制 EIS 电容和平带电压。在恒容(ConCap)模式下,反馈电路保持电容恒定,直接读出电位变化;青霉素浓度越高,酶解产生的 H+ 越多,平带电压向低电位移动越大,从而实现定量检测。

检测灵敏度

线性范围: 5.0 μM–25 mM(动态响应);最佳线性范围: 0.5 mM–10 mM;灵敏度斜率: ca. 116 mV/decade(0.5–10 mM);100 mV/decade(250 μM–25 mM);pH 灵敏度: ca. 55 mV/pH

效应效果

EIS-NT 在 5.0 μM–25 mM 无饱和,响应时间低于 5 min,漂移小;裸 EIS 2.5 mM 后、PSS 10 mM 后漂移增大并饱和。最佳线性范围 0.5–10 mM 斜率 116 mV/decade,250 μM–25 mM 为 100 mV/decade,优于裸 EIS 83 和 PSS 81 mV/decade。25 μM 即可响应。50 mM 葡萄糖与 polymix 缓冲液无干扰。两周仍高敏感,一个月灵敏度减半。作者认为其灵敏度与稳定性优于文献 EDIS 及安培/EnFET 传感器。

传感器的构成

  • 基底/换能器:p-Si 半导体衬底与背面 Al 接触层(300 nm),构成 EIS 电容结构的半导体侧与电极接触。
  • 绝缘层:30 nm SiO2 热氧化层与 55 nm Ta2O5 电子束蒸发氧化层,形成电解质–绝缘体–半导体电容,Ta2O5 提供 pH 敏感表面。
  • 纳米材料修饰层:PAMAM/SWNT 逐层组装(LbL)多层膜(约 3 个双分子层),由第四代 PAMAM 树枝状分子与羧基化 SWNT 交替沉积,形成高孔隙纳米膜。
  • 识别元件:青霉素酶(penicillinase,Bacillus cereus),吸附固定于 PAMAM/SWNT 或 Ta2O5 表面,催化青霉素 G 水解。
  • 信号产生层:青霉素酶催化青霉素 G 水解生成青霉酸并释放 H+,无需外加标记物,H+ 改变 Ta2O5 表面电荷。
  • 电解液/参比电极:pH 8 polymix 缓冲液(含 0.1 M KCl)与 Ag/AgCl 参比电极,提供离子通路和电位参考。

中文摘要

本研究报道了一种基于电容型电解质–绝缘体–半导体(EIS)场效应结构的青霉素生物传感器。该器件以 p-Si–SiO2–Ta2O5 为敏感电容结构,并在 Ta2O5 表面通过逐层组装(LbL)技术构建聚酰胺胺(PAMAM)树枝状分子与羧基化单壁碳纳米管(SWNT)的多层膜,再吸附固定青霉素酶。原子力显微镜和场发射扫描电镜显示,SWNT 渗入 PAMAM 层形成高度多孔膜,有利于 H+ 渗透和酶负载。电容–电压测量表明 EIS-NT 结构具有约 55 mV/pH 的 pH 灵敏度。在青霉素酶催化下,青霉素 G 水解释放 H+,使平带电压随浓度升高向低电位移动。恒容(ConCap)测量在 5.0 μM–25 mM 范围内获得约 116 mV/decade 的灵敏度,表明 PAMAM/SWNT 纳米结构显著提高了传感器性能。

英文摘要

Silicon-based sensors incorporating biomolecules are advantageous for processing and possible biological recognition in a small, reliable and rugged manufactured device. In this study, we report on the functionalization of field-effect (bio-)chemical sensors with layer-by-layer (LbL) films containing single-walled carbon nanotubes (SWNTs) and polyamidoamine (PAMAM) dendrimers. A capacitive electrolyte-insulator-semiconductor (EIS) structure modified with carbon nanotubes (EIS-NT) was built, which could be used as a penicillin biosensor. From atomic force microscopy (AFM) and field-emission scanning electron microscopy (FESEM) images, the LbL films were shown to be highly porous due to interpenetration of SWNTs into the dendrimer layers. Capacitance-voltage (C/V) measurements pointed to a high pH sensitivity of ca. 55 mV/pH for the EIS-NT structures. The biosensing ability towards penicillin of an EIS-NT-penicillinase biosensor was also observed as the flat-band voltage shifted to lower potentials at different penicillin concentrations. A dynamic response of penicillin concentrations, ranging from 5.0 microM to 25 mM, was evaluated for an EIS-NT with the penicillinase enzyme immobilized onto the surfaces, via constant-capacitance (ConCap) measurements, achieving a sensitivity of ca. 116 mV/decade. The presence of the nanostructured PAMAM/SWNT LbL film led to sensors with higher sensitivity and better performance.

关键词

青霉素生物传感器场效应传感器碳纳米管树枝状分子逐层组装青霉素酶