传感器类型
全细胞生物传感器
检测对象
HL-60白血病细胞(HL-60 cells);样品基质:PBS细胞悬液(pH 7.4)/EIS电解液(10 mM Fe(CN)6^3-/4-、1.0 M KCl)
检测原理
该传感器以玻璃碳电极为基底,表面修饰PS@PANI核壳纳米复合材料和AuNPs,形成三维导电且亲水的细胞固定界面。HL-60白血病细胞通过孵育粘附于PS/PANI/Au表面,细胞膜构成绝缘屏障,阻碍溶液中的Fe(CN)6^3-/4-氧化还原探针接近电极表面,使电子转移电阻Ret增大。细胞浓度越高,表面覆盖细胞越多,Ret越大,因此Ret与细胞浓度对数值呈线性关系。循环伏安中,细胞内鸟嘌呤可被氧化为8-氧鸟嘌呤,产生不可逆氧化峰,反映细胞活性。EIS通过拟合Nyquist图获得Ret,实现细胞浓度检测和增殖/凋亡监测。
检测灵敏度
LOD: 7.3 × 10^2 cells mL−1 (10σ);线性范围: 1.6 × 10^3–1.6 × 10^8 cells mL−1;R^2 = 0.9965
效应效果
该传感器在5个独立制备电极上检测细胞浓度,相对标准偏差(RSD)为2.47%,表明重现性良好。裸GCE、PS/PANI/Au/GCE和固定细胞后的电子转移电阻分别为41.2 Ω、133.3 Ω和601.0 Ω,说明纳米复合层和细胞膜均显著阻碍电子转移。作者指出其检出限与大肠杆菌O157:H7阻抗免疫传感器及K562白血病细胞EIS方法相当。传感器制备简单、成本低、可一次性使用,可用于细胞粘附、增殖和凋亡的电化学监测;96 h后阻抗急剧升高提示细胞死亡/凋亡。文中未报告选择性、抗干扰、稳定性或实际样品加标回收率。
传感器的构成
- 基底/换能器电极:玻璃碳电极(GCE),抛光后作为工作电极,提供导电基底和阻抗测量界面
- 纳米复合材料修饰层:聚苯乙烯/聚苯胺核壳纳米复合材料(PS@PANI/PS-PANI),提供导电性、生物相容性和较大比表面积,增强细胞固定
- 金纳米粒子修饰层:金纳米粒子(AuNPs)静电组装在PS@PANI表面,提高亲水性、生物相容性和电子传递,促进细胞粘附与活性保持
- 细胞固定层:HL-60白血病细胞(HL-60 cells)孵育粘附于PS/PANI/Au表面,形成细胞膜屏障并作为被测细胞
- 氧化还原探针:10 mM Fe(CN)6^3-/4-与1.0 M KCl,用于电化学阻抗谱(EIS)测量界面电子转移电阻
- 电解液:PBS(pH 7.4)用于细胞固定与循环伏安;EIS溶液含Fe(CN)6^3-/4-和KCl
- 检测仪器:PGSTAT30/FRA2电化学工作站,三电极体系,输出阻抗谱和电子转移电阻(Ret)
中文摘要
本研究将金纳米粒子(AuNPs)组装到聚苯乙烯/聚苯胺核壳纳米复合材料(PS@PANI)表面,构建具有三维结构的PS/PANI/Au界面,用于固定HL-60白血病细胞并制备细胞电化学传感器。固定后的HL-60细胞在循环伏安中表现出不可逆氧化响应,同时使电极电子转移电阻增大;电子转移电阻与细胞浓度对数值在1.6×10^3至1.6×10^8 cells/mL范围内呈良好线性关系,检出限为7.3×10^2 cells/mL(10σ)。该传感器制备简单、成本低、可一次性使用,可用于快速测定细胞浓度,并可通过阻抗变化监测细胞粘附、增殖和凋亡状态,表明PS@PANI/Au复合材料在肿瘤细胞检测和临床应用中具有潜在价值。
英文摘要
Gold nanoparticles (AuNPs) were assembled on the surface of polystyrene (PS) and polyaniline (PANI) core-shell nanocomposite (PS@PANI) for the immobilization of HL-60 leukemia cells to fabricate a cell electrochemical sensor. The immobilized cells exhibited irreversible voltammetric response and increased the electron transfer resistance with a good correlation to the logarithmic value of concentration ranging from 1.6 x 10(3) to 1.6 x 10(8) cells mL(-1) with a limit of detection of 7.3 x 10(2) cells mL(-1) at 10 sigma. This biosensor was simple, low cost and disposable, which implied that the PS@PANI/Au composites can regard as the potential applications for clinical applications.