电化学生物传感器 2010

Hydrodynamic focusing of conducting fluids for conductivity-based biosensors.

Biosensors & bioelectronics Nasir M, Ateya DA, Burk D, Golden JP, Ligler FS
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组成图示

Hydrodynamic focusing of conducting f... 传感器构成示意图

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传感器类型

电化学生物传感器

检测对象

磁珠(magnetic beads, MMI-105);样品基质:PBS导电样品流(鞘流为去离子水)

检测原理

在T型微通道中,低电导率去离子水鞘流将高电导率PBS样品流压向玻璃金电极表面,形成薄导电层并限制电场。外工作电极施加240 Hz方波驱动,产生约0.5 μA峰峰值恒定电流,内感测电极测量电位差。当导电磁珠被外部永磁体捕获在感测电极之间时,颗粒提供额外导电通路,电场线向颗粒偏转,电极间电阻和电压下降;颗粒尺寸越大、数量越多,电压变化越大。通过提高鞘流/样品流比可减小导电层厚度、增强电场密度,从而提高灵敏度;但雷诺数增大时聚焦层出现尖角,电流经尖角旁路且剪切力可能移除颗粒,因此存在最优Re<5。

检测灵敏度

未报告LOD、线性范围、灵敏度斜率或相关系数。

效应效果

概念验证中,2 μm磁珠被捕获后,感测电极间电压和电阻下降,且信号变化随鞘流/样品流比增大而增大;但实验灵敏度在高流比下趋于饱和,而模拟预测近似线性。共聚焦显示流比10–30及更高流速下聚焦层弯曲,雷诺数增大时尖角增强,导致电流旁路和颗粒剪切损失。作者认为Re<5可获得较平坦聚焦层,有利于提高电导灵敏度和表面结合效率。该平台可用于高通量检测多种细胞或颗粒,并降低堵塞风险。

传感器的构成

  • 基底/换能器电极:硼硅酸盐玻璃载玻片,光刻Ti(300 Å)粘附层与Au(3000 nm)四电极,外工作电极500 μm宽、内感测电极250 μm宽、间距2 mm
  • 微通道结构:PMMA(Plexiglas G)铣削T型双入口矩形微通道,宽1 mm、入口间高150 μm、鞘流入口后高250 μm、长3 cm,含500 μm×200 μm防漏沟槽与金属管接口
  • 鞘流:去离子水(DI H2O,σ≈5×10−8 S/m),以较高流速聚焦样品流并限制电场
  • 样品流:PBS(σ≈1.5 S/m),携带颗粒/细胞形成导电聚焦层
  • 捕获元件:外部永磁体,将2 μm磁珠(Bioclone MMI-105)捕获于感测电极之间
  • 信号标记物:导电磁珠(σ≈1×10^4 S/m)或模拟绝缘颗粒(σ≈1×10−9 S/m),改变电极间电阻
  • 读出电路:电压-电流转换电路、240 Hz函数发生器、锁相放大器、仪器放大器与LabVIEW数据采集
  • 表征/模拟:共聚焦显微镜(FWT Red Powder荧光染料可视化)与COMSOL Multiphysics有限元模拟

中文摘要

本文报道了一种基于流体聚焦的四电极电导率生物传感器。该器件采用双入口T型微通道,以低电导率去离子水作为鞘流,将高电导率PBS样品流压向玻璃表面上的金电极,从而在两个感测电极之间形成受限的导电电流路径。传感器通过外工作电极施加恒定电流,并由内感测电极测量电位差,以检测被捕获在电极间的颗粒或细胞。结合COMSOL有限元模拟与共聚焦显微流动实验,作者发现聚焦导电层的平坦程度取决于雷诺数和通道几何;较平坦的聚焦层有利于提高电导灵敏度和表面结合效率。实验以2 μm磁珠作为概念验证,证明在流体聚焦导电流中可通过电导测量检测被捕获颗粒。

英文摘要

Hydrodynamic focusing of a conducting fluid by a non-conducting fluid to form a constricted current path between two sensing electrodes is implemented in order to enhance the sensitivity of a 4-electrode conductance-based biosensor. The sensor has a simple two-inlet T-junction design and performs four-point conductivity measurements to detect particles immobilized between the sensing electrode pair. Computational simulations conducted in conjunction with experimental flow studies using confocal microscopy show that a flat profile for the focused layer is dependent on the Reynolds number for the chosen flow parameters. The results also indicate that a flat focused layer is desirable for both increased sensitivity as well as surface-binding efficiency. Proof of concept for conductance measurements in a hydrodynamically focused conducting fluid was demonstrated with entrapped magnetic beads.

关键词

流体聚焦电导率生物传感器微流控四电极测量磁珠雷诺数