电化学生物传感器 2010

Glucose biosensor based on electrodeposited platinum nanoparticles and three-dimensional porous chitosan membranes.

Biotechnology letters Chen H, Yuan R, Chai Y, Wang J, Li W
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组成图示

Glucose biosensor based on electrodep... 传感器构成示意图

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传感器类型

电化学生物传感器

检测对象

葡萄糖(glucose);样品基质为 0.1 M 磷酸盐缓冲液(PBS, pH 6.5)

检测原理

葡萄糖进入传感器后,被固定在三维多孔壳聚糖膜中的葡萄糖氧化酶(GOx)催化氧化,生成过氧化氢(H2O2)。壳聚糖膜经二氧化硅模板和 HF 溶蚀形成连通孔道,增大有效电极面积并允许底物/产物快速扩散;电沉积的铂纳米颗粒(PtNPs)分散在孔道中,为 H2O2 提供电催化活性位点,并促进 GOx 与电极间的电子转移。在 0.6 V 工作电位下,H2O2 在 PtNPs 表面发生电催化转化,产生与葡萄糖浓度成正比的安培电流。多孔结构与 PtNPs 的协同作用提高了 H2O2 电催化效率,使传感器具有快速响应和较宽线性范围。

检测灵敏度

LOD: 2 μM (S/N = 3);线性范围: 6 μM–4.2 mM;灵敏度斜率: 1.65 μA/mM;R^2 = 0.9981 (n = 17)

效应效果

该传感器在 0.6 V 下对连续加入葡萄糖的响应时间小于 5 s(达到 95% 稳态电流),线性范围为 6 μM–4.2 mM,相关系数 0.9981,表观米氏常数 KappM 为 3.1 mM,表明对葡萄糖有较高亲和力。选择性方面,色氨酸、苏氨酸、亮氨酸和精氨酸等常见干扰物未引起明显干扰。稳定性方面,传感器在 4 °C、0.1 M PBS(pH 6.5)中保存 2 周后仍保留 76% 初始电流响应。作者将其与部分已报道葡萄糖传感器比较,认为该体系制备简单、成本低、可微型化,并可用于其他酶的固定化,适用于食品、环境监测和生物分析中的葡萄糖检测。

传感器的构成

  • 基底/换能器电极:玻璃碳电极(GCE),抛光清洗后作为导电基底与电子转导界面
  • 模板成膜层:壳聚糖–二氧化硅纳米复合材料(chitosan–SiO2),滴涂干燥形成复合膜,SiO2 作为模板
  • 交联处理层:戊二醛(glutaraldehyde, GA)处理 2 h,交联壳聚糖并稳定膜结构
  • 多孔化修饰层:0.05 M HF 处理 10 min,溶蚀去除 SiO2,形成三维多孔壳聚糖膜
  • 纳米催化层:电沉积铂纳米颗粒(PtNPs,H2PtCl6/HCl,-0.2 V,300 s),增强 H2O2 电催化与电子传递
  • 识别元件层:葡萄糖氧化酶(GOx),4 °C 浸渍过夜,催化葡萄糖氧化并产生 H2O2

中文摘要

本文报道了一种基于电沉积铂纳米颗粒(PtNPs)和三维多孔壳聚糖膜的葡萄糖生物传感器。首先以二氧化硅纳米颗粒为模板制备壳聚糖–二氧化硅复合膜,经戊二醛交联后用氢氟酸溶蚀去除二氧化硅,形成具有大比表面积和连通孔道的三维多孔壳聚糖膜;随后在膜上电沉积铂纳米颗粒,并固定葡萄糖氧化酶(GOx)。三维多孔壳聚糖膜显著增大了有效电极面积,有利于负载 PtNPs 并促进电子转移;PtNPs 则提供良好生物相容性并增强对 GOx 催化产生的过氧化氢的电催化响应。该传感器在 0.6 V 下对葡萄糖呈安培响应,响应时间小于 5 s,线性范围为 6 μM–4.2 mM,检出限为 2 μM(S/N = 3)。该策略还可用于其他酶的固定化,具有制备简单、成本低和可微型化等优点。

英文摘要

The chitosan with three-dimensional porous structure greatly increased the effective electrode surface for loading of platinum nanoparticles and promoted efficient electron transfer. The resulting biosensor had a response time (within 5 s) and a linear response from 6 μM to 4.2 mM glucose with a detection limit of 2 μM (S/N=3). Moreover, the methodology can be applied for the immobilization of other enzymes.