电化学生物传感器 2010

Improvement of amperometric glucose biosensor by the immobilization of FcCD inclusive complex and carbon nanotube.

The Analyst Zheng L, Li J, Xu J, Xiong L, Zheng D, Liu Q, Liu W, Li Y, Yang S, Xia J
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组成图示

Improvement of amperometric glucose b... 传感器构成示意图

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传感器类型

电化学生物传感器

检测对象

葡萄糖(glucose);样品基质:0.1 M PBS(pH 6.5),文中讨论血液/尿液等实际样品

检测原理

葡萄糖进入传感膜后被葡萄糖氧化酶(GOx)识别并催化氧化,生成葡萄糖内酯和过氧化氢(H2O2),同时酶活性中心发生还原。Fc-羰基-β-环糊精包合复合物(FcCD)作为电子介体,在还原态/氧化态之间传递电子;碳纳米管(CNTs)提供导电通道并促进 FcCD 与玻璃碳电极(GCE)之间的电子跳跃,使催化电流在低于 200 mV 的低电位下产生。随着葡萄糖浓度升高,酶催化产生的电子流增加,FcCD 向电极传递的电子数增加,恒电位电流随之增大。该设计通过共价固定 FcCD 防止介体泄漏,并利用低电位避开抗坏血酸、尿酸和半胱氨酸干扰。

检测灵敏度

LOD: 2.2 × 10^-6 M;线性范围: 1.0 × 10^-5–2.90 × 10^-3 M;R^2 = 0.9999

效应效果

该传感器响应迅速,葡萄糖加入后 5 s 内达到稳态。在 5.0 mM 葡萄糖下,CNT-PLL-FcCD-GOx 电极电流为 8.46 mA,比无 CNT 的 PLL-FcCD-GOx(6.04 mA)高 40%,催化峰电位负移 30 mV。选择性方面,5 倍浓度的 L-半胱氨酸、抗坏血酸和尿酸不干扰葡萄糖检测。重现性良好,8 个电极在 0.2 mM 葡萄糖中 RSD 为 2.8%;单电极连续 200 次测量后电流仅下降 4.9%。4 ℃ 干燥保存 21 天后仍保持初始响应的 88%。作者认为该无试剂安培葡萄糖传感器适用于血液/尿液等实际样品中葡萄糖的快速、抗干扰检测。

传感器的构成

  • 基底电极:玻璃碳电极(GCE),提供导电基底与电子换能界面
  • 纳米修饰层:羧基化碳纳米管(CNTs),提高导电性并促进 FcCD 与电极间电子传递
  • 共价连接层:聚-L-赖氨酸(PLL),经 EDC/NHS 偶联到 CNT 羧基,提供氨基连接 FcCD
  • 电子介体层:Fc-羰基-β-环糊精包合复合物(FcCD),共价固定于 PLL,作为低电位电子传递介体并防止 Fc 泄漏
  • 识别元件:葡萄糖氧化酶(GOx),经 EDC 共价连接,催化葡萄糖氧化并产生 H2O2
  • 成膜固定层:Nafion 乙醇溶液(5%),与修饰复合物混合涂覆,形成稳定传感膜

中文摘要

本文构建了一种新型葡萄糖生物传感器,以二茂铁-羰基-β-环糊精包合复合物(FcCD)作为电子传递介体,碳纳米管(CNTs)作为电子传递促进剂。FcCD 包合复合物与葡萄糖氧化酶(GOx)通过聚-L-赖氨酸(PLL)共价连接到 CNTs 上,制备成葡萄糖传感器。该传感器在低于 200 mV 的低电位下实现葡萄糖的电催化氧化,从而避免实际样品中主要干扰物 L-半胱氨酸、抗坏血酸和尿酸的干扰,即使这些干扰物浓度达到葡萄糖的 5 倍也不影响检测。传感器对葡萄糖响应迅速,葡萄糖浓度在 1.0×10^-5 至 2.90×10^-3 M 范围内呈良好线性,检出限为 2.2×10^-6 M。

英文摘要

A novel glucose biosensor was constructed by using ferrocene-carbonyl-beta-cyclodextrin (FcCD) inclusive complex as electron-transfer mediator and carbon nanotubes (CNTs) as electron-transfer promoter. FcCD inclusive complex and glucose oxidase (GOx) were covalently bonded to CNTs by poly-l-lysine (PLL) to fabricate a glucose biosensor. The electrocatalytic oxidation of glucose at the biosensor occurred at low potential below 200 mV, avoiding the interference of the main interfering substances in real samples containing a 5-times higher concentration of l-cysteine, ascorbic acid, and uric acid. The biosensor showed fast response for glucose. A broad linear range of glucose concentration from 1.0 x 10(-5) to 2.90 x 10(-3) M was obtained and the detection limit was 2.2 x 10(-6) M.