全细胞生物传感器 2010

Toxicity response of electroactive microbial biofilms--a decisive feature for potential biosensor and power source applications.

Chemphyschem : a European journal of chemical physics and physical chemistry Patil S, Harnisch F, Schröder U
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组成图示

Toxicity response of electroactive mi... 传感器构成示意图

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传感器类型

全细胞生物传感器

检测对象

磺胺甲噁唑(sulfamethoxazole)、磺胺二甲基嘧啶(sulfadiazine)、氯胺B(chloramine B)、铜离子(Cu2+)、银离子(Ag+)、铅离子(Pb2+)、汞离子(Hg2+);样品基质:废水来源厌氧MFC阳极液(含乙酸底物)

检测原理

在微生物燃料电池中,电活性微生物或浮游细胞以乙酸为电子供体进行厌氧氧化,释放的电子经胞外电子转移途径到达石墨阳极:生物膜可直接将电子传递至电极,浮游细胞则依赖蒽醌-2-磺酸盐(AQ-2S)介体在细胞与电极间穿梭。阴极铁氰化钾接受电子,外电路形成电流和电位。当样品中加入生物杀灭剂时,若毒性物质抑制细胞代谢、膜完整性或电子传递链,乙酸氧化速率下降,阳极电流随之降低;生物膜因胞外基质和群体耐受,对磺胺类、氯胺B及重金属离子表现出低响应,电流基本不变;浮游细胞则出现明显电流下降。该体系无HCR、RCA或酶催化沉积等化学放大,信号放大主要依赖微生物生物电催化和介体循环。

检测灵敏度

原文未报告LOD、线性范围、灵敏度斜率或R^2。

效应效果

实验使用三个独立生物膜,每个生物杀灭剂浓度至少重复两次。电活性生物膜在磺胺甲噁唑、磺胺二甲基嘧啶、氯胺B、Cu2+、Ag+、Pb2+和Hg2+暴露下,电流与电位变化均在实验误差范围内;Cu2+达6 mg/L、氯胺B达4 mg/L时也未见明显抑制,HPLC显示乙酸降解不受影响。同源浮游细胞在蒽醌-2-磺酸盐介导MFC中则对较低浓度生物杀灭剂敏感,电流显著下降且乙酸未完全降解。作者认为该结果说明天然电活性生物膜抗干扰能力强,适合废水处理MFC长期运行,但不适合作为毒性传感器识别元件;浮游细胞或人工固定化细胞更可能用于毒性传感,而生物膜型BOD传感器对毒素具有低交叉选择性。

传感器的构成

  • 换能器电极:多晶石墨棒(polycrystalline graphite rod)作阳极工作电极,承载电活性生物膜并采集电流
  • 参比电极:Ag/AgCl(饱和KCl)电极,用于恒电位控制与电位测量
  • 对电极/阴极:石墨棒与K3Fe(CN)6溶液,作为阴极电子受体
  • 识别元件:废水来源电活性微生物生物膜(electroactive microbial biofilms, EAB)或同源浮游细胞(planktonic cells),作为生物电催化识别元件
  • 电子供体:乙酸(acetate, 10 mM),被微生物氧化并提供电子
  • 电子介体:蒽醌-2-磺酸盐(anthraquinone-2-sulfonate, AQ-2S),用于浮游细胞MFC中促进胞外电子转移
  • 离子交换膜:Fumasep阳离子交换膜,分隔阴阳极并允许离子迁移
  • 信号读出:Autolab PGSTAT 30/EG&G PAR 263A与Keithley 2700/7700,经100 Ω负载记录电流/电位

中文摘要

微生物电化学系统(BES)如微生物燃料电池(MFC)依赖电活性微生物生物膜在阳极进行生物电催化氧化,是废水处理与在线毒性传感的潜在平台。本研究以废水来源的混合培养电活性微生物生物膜为对象,在恒电位半电池和双室MFC中考察典型生物杀灭剂对其生物电催化性能的影响。测试对象包括磺胺甲噁唑、磺胺二甲基嘧啶、氯胺B以及Cu2+、Ag+、Pb2+、Hg2+,浓度多高于废水常见水平。实验以乙酸为底物,石墨棒为工作电极,Ag/AgCl为参比电极,Fumasep阳离子交换膜分隔阴阳极,铁氰化钾溶液作为阴极电子受体。结果表明,电活性生物膜的电流和电位在暴露于上述生物杀灭剂后基本不变,乙酸降解亦未受抑制;同源浮游细胞在蒽醌-2-磺酸盐介导的MFC中则出现明显性能下降。作者据此认为天然电活性生物膜对生物杀灭剂高度耐受,不适合作为毒性传感器识别元件,而浮游细胞或人工固定化细胞更具传感潜力;该结果支持MFC用于废水处理中的抗干扰稳定性。

英文摘要

Herein, we investigate the effect of exemplary biocides on wastewater-derived electroactive microbial biofilms. We show that the current response of these biofilms as a measure of their bioelectrocatalytic performance is not affected by the presence of antimicrobial compounds such as the sulfonamide-based antibiotics sulfamethaxozole and sulfadiazin, the disinfectant chloramine B and the metal ions Cu(2+), Ag(+), Pb(2+), and Hg(2+), even at concentrations an order of magnitude higher than average concentrations of these compounds in wastewaters. In contrast to the electroactive biofilms, planktonic cells of the same origin, studied in a mediator-based microbial fuel cell, are massively affected by the presence of the antimicrobial agents.