场效应晶体管(FET)生物传感器 2010

Real-time, step-wise, electrical detection of protein molecules using dielectrophoretically aligned SWNT-film FET aptasensors.

Lab on a chip An T, Kim KS, Hahn SK, Lim G
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组成图示

Real-time, step-wise, electrical dete... 传感器构成示意图

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传感器类型

场效应晶体管(FET)生物传感器

检测对象

凝血酶(thrombin),样品基质:磷酸盐缓冲液(PB,pH 5.6)

检测原理

凝血酶适配体共价固定于 SWNT-COOH 悬空膜表面,作为识别元件特异性捕获凝血酶。在 pH 5.6 磷酸盐缓冲液中,凝血酶带正电荷,结合后对 p 型 SWNT 通道产生静电门控,使源漏电流下降;同时 SWNT 与 Cr/Au 电极间的 Schottky 势垒被调制,局部功函数降低,从而获得数秒内的快速响应。悬空 SWNT 膜提供双侧结合面积并增强扩散/对流,提高信号。无标记检测中,电流变化随凝血酶浓度阶梯式增加,70 pM–70 nM 范围内呈对数线性,实现实时电学读出。

检测灵敏度

LOD: ca. 7 pM;线性范围: 70 pM–70 nM(log–log 线性,n = 4);噪声标准差: ca. 0.059;7 pM 信号: ca. 0.24(约为噪声 4 倍)

效应效果

非特异对照中,未固定适配体的 SWNT-COOH 膜对 70 pM 凝血酶和 VEGF 均产生有意义电流变化,响应时间小于 10 s;经 Tween 20 封闭后,VEGF 加入无电流变化,而凝血酶引起阶梯式电流下降,证明选择性。传感器响应时间为数秒,快于基底上单管传感器报道的数十秒至数分钟;检测限约 7 pM,低于单 SWNT 传感器约 10 nM。电流变化与浓度成比例,70 pM–70 nM 对数线性(n=4),噪声标准差约 0.059,7 pM 信号约 0.24,为噪声 4 倍。作者认为该可寻址 SWNT 膜 FET 适配体传感器可用于生物标志物诊断。

传感器的构成

  • 基底/换能器电极:Si 晶圆、1 μm SiN 绝缘层、Cr/Au 20/200 nm 悬臂电极阵列与 SU-8 钝化层,提供 FET 源漏/栅极与悬空通道
  • 纳米材料修饰层:SWNT-COOH 悬空膜,经介电电泳和水面张力在电极间对齐,形成 p 型半导体通道并增大结合面积
  • 识别元件:凝血酶 DNA 适配体 5′-NH2-d(GGTTGGTGTGGTTGG)-3′,经 EDC/sulfo-NHS 酰胺键共价固定于 SWNT-COOH,特异性结合凝血酶
  • 封闭剂:Tween 20 涂覆未占据位点,减少非特异性结合
  • 信号标记物:无外源标记,利用凝血酶正电荷静电门控与 SWNT/电极 Schottky 势垒调制产生电流变化
  • 读出层:缓冲液/参考电极与 HP 4156A 半导体参数分析仪,在 10 mV 源漏偏压下监测电流/电导

中文摘要

本文报道了一种基于介电电泳对齐单壁碳纳米管(SWNT)悬空膜的场效应晶体管(FET)适配体传感器。通过微机电系统工艺在硅晶圆上制备氮化硅(SiN)绝缘层和铬/金(Cr/Au)悬臂电极阵列,并利用介电电泳与水面张力将羧基化 SWNT(SWNT-COOH)膜精确沉积于电极之间,形成可寻址、大结合面积的悬空通道。凝血酶 DNA 适配体经 EDC/sulfo-NHS 酰胺键共价固定于 SWNT-COOH 膜,并用 Tween 20 封闭非特异位点。该传感器在 pH 5.6 磷酸盐缓冲液中呈 p 型特性,可实时、无标记、电学检测凝血酶。凝血酶结合引起源漏电流阶梯式下降,响应时间为数秒,检测浓度低至约 7 pM,且信号在 70 pM–70 nM 范围内随浓度呈对数线性变化。

英文摘要

Aptamer functionalized addressable SWNT-film arrays between cantilever electrodes were successfully developed for biosensor applications. Dielectrophoretically aligned SWNT suspended films made possible highly specific and rapid detection of target proteins with a large binding surface area. Thrombin aptamer immobilized SWNT-film FET biosensor resulted in a real-time, label-free, and electrical detection of thrombin molecules down to a concentration of ca. 7 pM with a step-wise rapid response time of several seconds.