传感器类型
其他(金纳米棒LSPR光学生物传感器)
检测对象
人肌钙蛋白I(human cardiac troponin I, h-cTnI/cTnI);实验样品基质为Tris缓冲液,临床目标基质为血清/血液。
检测原理
金纳米棒因各向异性具有横向和纵向局域表面等离子体共振(LSPR)峰,其中纵向峰对纳米棒周围介电环境变化更敏感。合成后先用CTAB稳定,再用PSS静电包覆以屏蔽毒性并引入负电表面,随后将抗人cTnI单克隆抗体偶联到PSS层。加入含h-cTnI样品后,抗体与抗原特异性结合,改变纳米棒表面介电环境,使纵向LSPR峰发生红移且吸光度下降;当h-cTnI浓度较高时,多价结合可驱动纳米棒聚集,进一步引起峰红移和展宽。通过UV-vis-NIR光谱记录纵向峰位置/强度变化,即可无标记、均相地定量h-cTnI。提高长径比至约5.5可增强纵向峰灵敏度。
检测灵敏度
LOD: 10 ng/mL
效应效果
该方法为无标记、均相免疫检测,避免了ELISA中多次洗涤和酶标步骤,适合快速筛查。实验中使用AR≈5.5的金纳米棒,PSS包覆使纵向LSPR峰蓝移28 nm,抗体偶联后红移18 nm;加入1–200 ng/mL h-cTnI后,纵向峰由846 nm连续红移至866 nm,吸光度下降,检测限为10 ng/mL。以山羊IgG作对照用于评估非特异性吸附,作者认为纵向峰变化主要来自抗-h-cTnI与h-cTnI的特异性识别。与20 nm柠檬酸稳定球形金纳米颗粒相比,相同浓度下金纳米棒LSPR变化更明显,灵敏度更高。作者认为其可用于急性心肌损伤/心肌梗死早期检测,并计划利用长径比依赖性开展多标志物检测。
传感器的构成
- 换能器/基底:金纳米棒(Au NRs,AR≈5.5,CTAB辅助种子介导生长,少量HCl调控长径比),提供纵向LSPR光学换能
- 初始表面活性剂层:CTAB双分子层(十六烷基三甲基溴化铵),合成中稳定纳米棒并赋予正电表面
- 聚电解质修饰层:PSS(聚苯乙烯磺酸钠,Mw 70000),静电包覆以屏蔽CTAB毒性并提供负电结合位点
- 识别元件:抗人cTnI单克隆抗体(anti-h-cTnI mAb,50 μg/mL),通过静电与疏水作用偶联于PSS层,特异性结合h-cTnI
- 信号标记物:无外源标记,金纳米棒自身纵向LSPR作为内禀光学信号
中文摘要
本文报道了一种基于金纳米棒的简便、快速液相生物传感方法,用于检测人肌钙蛋白I(h-cTnI),以辅助急性心肌损伤的早期诊断。金纳米棒具有局域表面等离子体共振(LSPR)特性,其纵向共振峰对周围介电环境变化高度敏感。作者将抗人cTnI单克隆抗体偶联到金纳米棒表面,当样品中的h-cTnI与抗体特异性结合时,纳米棒表面介电环境改变,引起纵向LSPR波长发生明显红移,从而通过紫外-可见-近红外吸收光谱实现无标记检测。为提高灵敏度,在种子介导生长溶液中加入少量盐酸,将金纳米棒长径比提高至约5.5。实验结果表明,该方法的检测限为10 ng/mL,且相比常规球形金纳米颗粒具有更高的检测灵敏度。
英文摘要
A facile, rapid, solution-phase method of detecting human cardiac troponin I for sensing myocardial damage has been described using gold nanorods-based biosensors. The sensing is demonstrated by the distinct change of the longitudinal surface plasmon resonance wavelength of the gold nanorods to specific antibody-antigen binding events. For a higher sensitivity, the aspect ratio of gold nanorods is increased up to ca 5.5 by simply adding small amount of HCl in seed-mediated growth solution. Experimental results show that the detecting limit of the present method is 10 ng/mL. Contrast tests reveal that these gold nanorods-based plasmonic biosensors hold much higher sensitivity than that of conventionally spherical gold nanoparticles.