电化学生物传感器 2010

Thin-walled graphitic nanocages as a unique platform for amperometric glucose biosensor.

ACS applied materials & interfaces Guo CX, Sheng ZM, Shen YQ, Dong ZL, Li CM
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组成图示

Thin-walled graphitic nanocages as a ... 传感器构成示意图

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传感器类型

电化学生物传感器

检测对象

葡萄糖(glucose);样品基质:PBS 缓冲液、人血清(human serum)

检测原理

葡萄糖氧化酶(GOD)固定于薄壁石墨纳米笼修饰的玻璃碳电极上,纳米笼的高石墨化介孔结构促进 GOD 活性中心 FAD/FADH2 与电极间的直接电子转移,电子转移速率常数达5.84 s-1。检测时,葡萄糖与 GOD 结合并被催化氧化,FAD 被还原为 FADH2,随后电子经石墨纳米笼传递至电极;在-0.5 V恒电位下,葡萄糖氧化与溶解氧还原竞争进行,溶解氧的存在增强安培响应。随着葡萄糖浓度升高,稳态电流变化增大,在0.02–6.2 mM范围内呈线性,响应时间约5 s。该机制无需外加电子媒介体,依靠纳米笼导电网络实现低电位酶催化信号放大。

检测灵敏度

LOD: 8 µM (S/N = 3);线性范围: 0.02–6.2 mM;灵敏度: 13.3 µA mM-1 cm-2

效应效果

该传感器在0.1 M空气饱和PBS中对葡萄糖的响应时间约5 s,灵敏度为13.3 µA mM-1 cm-2,线性范围0.02–6.2 mM。对人血清样品(标称葡萄糖浓度5.85 mM)检测得到5.88 mM,未报告加标回收率,但与产品说明书一致,表明实际样品测量准确。多巴胺、抗坏血酸、对乙酰氨基酚和尿酸在0.1 mM生理相关浓度下均产生可忽略响应,显示良好抗干扰性。连续安培测量3 h、每5天间隔测试并4 °C保存,4周内保留95%原始响应;10次连续测量RSD为4.1%,8个传感器间RSD不超过6.8%。论文未给出与ELISA等方法的直接数值对比,但作者将其与其他葡萄糖生物传感器比较,认为该平台可用于临床葡萄糖检测。

传感器的构成

  • 基底/换能器电极:玻璃碳电极(GCE),提供导电基底并用于恒电位安培信号读出
  • 纳米材料修饰层:薄壁石墨纳米笼(thin-walled graphitic nanocages),具石墨层间距约0.34 nm、比表面积613 m2 g-1、介孔3–20 nm,促进 GOD 固定与电子转移
  • 识别元件:葡萄糖氧化酶(GOD),固定于薄壁石墨纳米笼上,催化葡萄糖氧化并保持天然构象
  • 信号标记物:无外加标记物;GOD 辅基 FAD/FADH2 作为内源氧化还原位点参与直接电子转移
  • 电子供体/底物:葡萄糖(glucose),被 GOD 氧化并驱动安培电流变化
  • 电子受体/介质:溶解氧(O2)与 PBS 缓冲液(pH 7.0),参与竞争性氧还原并维持酶活性

中文摘要

本文合成了一种具有发育良好石墨结构、高比表面积和显著介孔结构的薄壁石墨纳米笼材料,并将其用于构建安培葡萄糖生物传感器。该材料比表面积达613 m2 g-1,介孔孔径主要分布在3–20 nm,可为葡萄糖氧化酶(GOD)固定提供良好基质。GOD 固定于石墨纳米笼修饰的玻璃碳电极上后,仍保持天然二级结构,并实现活性中心 FAD/FADH2 的直接电子转移,电子转移速率常数为5.84 s-1。在-0.5 V恒电位安培检测中,传感器对葡萄糖表现出高且可重复的灵敏度13.3 µA mM-1 cm-2、线性动态范围0.02–6.2 mM和约5 s的快速响应。该传感器可准确检测人血清中的葡萄糖,并对多巴胺、抗坏血酸、对乙酰氨基酚和尿酸等常见干扰物具有有效区分能力。

英文摘要

A thin-walled graphitic nanocages material with well-developed graphitic structure, large specific surface area and pronounced mesoporosity was synthesized and used to construct a sensing interface for an amperometric glucose biosensor, showing a high and reproducible sensitivity of 13.3 μA mM(-1) cm(-2), linear dynamic range of 0.02-6.2 mM, and fast response time of 5 s. It was successfully used to accurately detect glucose in human serum with effective discrimination to common interference species such as dopamine, ascorbic acid, acetaminophen, and uric acid.