表面等离子共振(SPR)生物传感器 2010

Investigation on an application of silver substrates for sensitive surface plasmon resonance imaging detection.

Journal of the Optical Society of America. A, Optics, image science, and vision Choi SH, Byun KM
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组成图示

Investigation on an application of si... 传感器构成示意图

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传感器类型

表面等离子共振(SPR)生物传感器

检测对象

生物分子相互作用(biomolecular interactions,如抗原/抗体、蛋白/蛋白、DNA);示例检测对象为 DNA 杂交物(DNA hybridization,ssDNA/dsDNA);样品基质为水溶液(water solution,n≈1.33)

检测原理

TM 偏振光经 SF10 棱镜以 Kretschmann 构型激发银或 Ag/Au 金属膜中的表面等离子体,反射率 R 对界面局部折射率高度敏感。生物分子结合形成 SAM 或 DNA 杂交层,使局部折射率 n4 增加,引起 SPR 共振角位移和反射率变化;结合量越大,折射率变化越大,反射率变化越大。银膜比金膜 SPR 曲线更窄,灵敏度更高,但 Ag2O 氧化层具有非零虚部介电常数,增加等离子体阻尼,使曲线展宽、最小反射率变浅,灵敏度下降。Ag/Au 双金属用超薄金层防止银氧化,同时保留银的高灵敏度,实现信号放大。

检测灵敏度

峰值灵敏度: 1.64(Ag 60 nm、无 Ag2O);0.283(Au 56 nm);0.680(金基底 DNA 示例,Au 56 nm);3.059(Ag/Au,Ag 50 nm、无 Au);1.980(Ag/Au,Au 5 nm);灵敏度斜率: A=0.676(金基底)、A=1.992(Ag/Au 双金属基底);相关系数: R=0.9999(金基底与双金属基底)

效应效果

本文为数值模拟研究,未报告选择性、抗干扰、RSD、实际样品回收率或长期稳定性。主要性能为灵敏度:Ag 60 nm 无氧化时峰值灵敏度 1.64;Au 56 nm 时 0.283;DNA 杂交示例中,金基底最大灵敏度 0.680,Ag/Au 无金时 3.059,Au 5 nm 时 1.980,约提高 2.9 倍。反射率变化由金基底的 0.012 增至双金属的 0.036,线性斜率 A 由 0.676 增至 1.992,R 均为 0.9999。作者主张 Ag/Au 双金属可防银氧化并显著增强 SPR 成像信号。

传感器的构成

  • 基底/棱镜:SF10 棱镜,Kretschmann 构型中传导 TM 偏振光并激发表面等离子体
  • 附着层:铬(Cr)2 nm,增强银膜与棱镜附着
  • 等离子体金属层:银(Ag)薄膜,初始 40/60 nm,提供窄 SPR 曲线和高灵敏度
  • 氧化层:氧化银(Ag2O),模拟银氧化,增加等离子体阻尼并降低灵敏度
  • 保护金属层:金(Au)薄膜,Ag/Au 双金属中覆盖银表面防止氧化,示例厚度 <3 nm 或 5 nm
  • 识别/结合层:自组装单分子层(SAM)/DNA 杂交层(ssDNA/dsDNA),模拟生物分子结合并改变局部折射率
  • 样品介质:水溶液(H2O,n≈1.33),提供分析物环境并参与 SPR 界面折射率

中文摘要

本研究针对基于银基底的表面等离子共振(SPR)成像生物传感器进行理论分析,旨在说明尽管银化学稳定性较差,仍可用于生物分子相互作用的高灵敏检测。计算表明,银膜氧化会形成氧化银(Ag2O)层,使SPR曲线变宽、共振处最小反射率变浅,从而降低灵敏度;目标分析物结合引起局部折射率变化时,也会通过共振角位移和曲线展宽影响成像灵敏度。为克服银氧化问题,作者提出在银膜上覆盖超薄金层的Ag/Au双金属基底,既能防止银氧化,又能保持银膜的高灵敏度。与常规金基底相比,Ag/Au双金属基底可显著放大SPR成像信号,为银基底用于生物分子相互作用的高灵敏SPR成像检测提供了可行方案。

英文摘要

A surface plasmon resonance (SPR) imaging biosensor based on silver substrates was investigated to demonstrate that silver could be used as a substrate material for sensitive detection of biomolecular interactions, despite its poor chemical stability. The calculation results showed that oxidation of silver film may lead to a decrease in the sensitivity due to a variation in SPR characteristics such as a broader curve width and shallower minimum reflectance at resonance. The effect of a change in the refractive index of target analytes on the sensitivity was also explored. In particular, it is noteworthy that Ag/Au bimetallic substrates with a thin gold protection layer to prevent oxidation of a silver film can provide a significant amplification of SPR imaging signals in comparison with conventional gold substrates.