表面增强拉曼(SERS)生物传感器 2011

A SERS DNAzyme biosensor for lead ion detection.

Chemical communications (Cambridge, England) Wang Y, Irudayaraj J
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组成图示

A SERS DNAzyme biosensor for lead ion... 传感器构成示意图

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传感器类型

表面增强拉曼(SERS)生物传感器

检测对象

铅离子(Pb2+);PBS 缓冲液/环境水样(原文未明确实际样品基质)

检测原理

巯基修饰的 DNAzyme 17E 通过 Au–S 键固定于金涂层表面,经 6-巯基己烷封闭后,与 DNA/RNA 嵌合底物 17DS 杂交。17DS 的 5′端延伸序列与负载短 DNA 和拉曼报告基巯基苯甲酸(MBA)的 45 nm 金纳米颗粒(AuNPs)杂交,使 AuNPs 锚定在金表面并产生强 SERS 信号。Pb2+ 与 17E 特异性结合并激活其催化活性,切割 17DS 中的 RNA 位点,导致连接 AuNPs 的片段从金表面释放。Pb2+ 浓度越高,释放的 AuNPs 越多,MBA 在 1078 和 1584 cm−1 的拉曼峰强度越低。以无 Pb2+ 对照归一化后,SERS 强度下降与 Pb2+ 浓度相关,实现定量检测;AuNPs 的电磁增强提供信号放大。

检测灵敏度

LOD: 20 nM;检测范围: 20 nM–1 mM

效应效果

该传感器对 Pb2+ 具有较高选择性:在 Zn2+、Mn2+、Ni2+、Cu2+、Mg2+ 各 2 mM 干扰下,仅 500 nM Pb2+ 引起 SERS 信号显著下降,其他离子仅轻微或无变化。SEM 显示金表面 AuNPs 分布均匀,随机多点拉曼信号一致,表明制备与检测重现性良好。作者认为其灵敏度与已报道的电化学和荧光 DNAzyme 传感器相当,并因 Raman 光谱便携性可发展为便携式设备,且可通过不同 Raman 报告基扩展至多种金属离子检测。

传感器的构成

  • 基底/换能器:金涂层表面(gold-coated surface),提供 Au–S 固定 DNAzyme 并作为 SERS 增强基底。
  • 识别元件:巯基修饰 DNAzyme 17E,通过 Au–S 键固定于金表面,特异性结合 Pb2+ 并催化切割。
  • 封闭剂:6-巯基己烷(6-mercaptohexane),封闭金表面非特异性位点。
  • 切割底物:DNA/RNA 嵌合序列 17DS(含核糖腺苷 γA),5′端延伸,杂交于 DNAzyme,Pb2+ 诱导切割。
  • 纳米探针:45 nm 金纳米颗粒(AuNPs),提供 SERS 电磁增强,连接捕获 DNA 与拉曼报告基。
  • 信号标记物:巯基苯甲酸(MBA)作为 Raman reporter,特征峰 1078 和 1584 cm−1 用于定量。
  • 杂交连接 DNA:AuNPs 上连接的短 DNA 序列,与 17DS 5′端延伸互补,使 AuNPs 锚定在切割底物上。

中文摘要

本文报道了一种基于 DNAzyme 的表面增强拉曼散射(SERS)生物传感器,用于灵敏、选择性检测铅离子(Pb2+)。该传感器利用 DNAzyme 17E 与 Pb2+ 结合后特异性催化切割 DNA/RNA 底物 17DS 的特性,将巯基修饰的 DNAzyme 通过 Au–S 键固定于金涂层表面,并用 6-巯基己烷封闭。17DS 的 5′端延伸序列与负载短 DNA 和拉曼报告基巯基苯甲酸(MBA)的 45 nm 金纳米颗粒(AuNPs)杂交,使 AuNPs 锚定在金表面。当 Pb2+ 存在时,17E 被激活并切割 17DS,导致 AuNPs 从表面释放,MBA 的 SERS 特征峰强度随 Pb2+ 浓度增加而下降。该传感器检测范围为 20 nM 至 1 mM,最低检测浓度为 20 nM,并对 Zn2+、Mn2+、Ni2+、Cu2+ 和 Mg2+ 等干扰离子表现出良好选择性。

英文摘要

SERS biosensor for sensitive and selective detection of lead ions (Pb(2+)) based on DNAzyme was developed by taking advantage of the specific catalytic reaction of DNAzyme upon binding to Pb(2+) ions. Detection was accomplished by SERS nanoprobe labeled with DNA and Raman reporters for signal amplification.