传感器类型
其他(偏振全内反射生物传感器)
检测对象
牛血清白蛋白(BSA);样品基质:磷酸盐缓冲液(PBS);另以氯化钠(NaCl)水溶液校准体折射率
检测原理
偏振全内反射生物传感器以 SF11/BK7 棱镜与玻璃片界面作为换能界面。He-Ne 激光经偏振器、SBC 和 PEM 形成 45° 线偏振光,PEM 对 p 分量进行 50 kHz 相位调制。当样品体折射率或表面生物膜厚度改变时,全内反射的 s/p 偏振分量反射系数和相位差发生变化。系统选择初始相位延迟 α=-ΔΦmax,使角度偏振曲线(APC)峰角位置仅响应体折射率,峰幅值响应表面薄膜沉积。BSA 非特异性结合到 APTES 氨基玻璃表面形成生物膜,改变界面光学特性;反射光经分析器、探测器进入锁相放大器,提取一、二次谐波并计算 APC,从而同时获得体折射率和膜厚信息。该过程为无标记检测,未使用酶或核酸放大。
检测灵敏度
LOD: better than 10^-5 RIU;生物膜厚度 LOD: 0.5 nm;相位分辨率: 0.02°
效应效果
实验中,清洁玻璃表面因静电排斥几乎不吸附 BSA,仅观察到体折射率变化;APTES 氨基化玻璃可非特异性结合 20 和 50 μg/mL BSA,峰幅值随吸附动态上升且不回基线,峰角位置随 PBS 恢复,说明体折射率与膜厚信息可独立读取。体折射率检测限优于 10^-5 RIU,与商用 SPR 的 10^-5~10^-6 RIU 相当;0.02° 相位分辨率对应约 0.5 nm 生物膜厚度。TIR 结构无需金属膜,可结合透射成像、DNA 芯片、细胞培养和显微镜,适合低成本、便携和多参数生物传感。论文未报告 RSD、回收率或特异性抗体识别性能。
传感器的构成
- 基底/换能器:SF11 或 BK7 耦合棱镜,提供全内反射界面并承载传感表面
- 传感表面:玻璃片(Cargile Lab)与棱镜浸没接触,作为生物膜沉积界面
- 表面修饰层:3-(aminopropyl)-triethoxysilane(APTES)硅烷化氨基玻璃,提供非特异性结合位点
- 识别元件:氨基官能化玻璃表面,通过非特异性吸附捕获 BSA,无特异性抗体或适配体
- 样品室:20 μl 流动注射池,引入 PBS/BSA 样品并维持液-棱镜接触
- 光学调制层:Glan-Taylor 偏振器、Soleil-Babinet 补偿器(SBC)和光弹调制器(PEM),产生 45° 偏振并对 p 分量进行 50 kHz 相位调制
- 信号读出:45° 分析器、光电探测器与锁相放大器,提取一/二次谐波得到相位差和振幅
中文摘要
本文提出一种基于时间相位调制的偏振全内反射(TIR)生物传感器概念。系统利用 632.8 nm He-Ne 激光,经偏振器、Soleil-Babinet 补偿器和光弹调制器产生 45° 线偏振光,并对 p 偏振分量进行 50 kHz 正弦相位调制。光在 SF11 或 BK7 棱镜与玻璃传感片界面发生全内反射,反射光的 s 和 p 偏振分量相位差及振幅随样品体折射率和表面生物膜厚度变化。通过锁相放大器提取谐波,可构建角度偏振曲线,其峰角位置对应体折射率变化,峰幅值对应表面薄膜沉积动态。实验表明,体折射率检测灵敏度优于 10^-5 RIU,生物膜厚度灵敏度约为 0.5 nm。该方案无需金属膜,可基于廉价透明基底实现低成本、多参数生物传感与显微成像应用。
英文摘要
In this paper, a concept of polarimetric total internal reflection (TIR) biosensor based on the method of temporal phase modulation is presented. Measurements of the phase difference between s- and p- polarized light combined with their amplitudes allow simultaneous detection of the bulk refractive index and thickness of the surface biofilms. Obtained experimental sensitivity is better than 10(-5) in terms of refractive index unit and 0.5 nm in biolayer thickness. Relatively simple technological implementation of the TIR sensors on the base of inexpensive and transparent substrates opens a number of novel applications in biosensing and microscopy.