电化学生物传感器 2011

Electrodeposition of chitosan-glucose oxidase biocomposite onto Pt-Pb nanoparticles modified stainless steel needle electrode for amperometric glucose biosensor.

Journal of materials science. Materials in medicine Guo M, Fang H, Wang R, Yang Z, Xu X
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组成图示

Electrodeposition of chitosan-glucose... 传感器构成示意图

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传感器类型

电化学生物传感器

检测对象

葡萄糖(glucose),样品基质为PBS缓冲液(pH 7.0)

检测原理

该传感器以不锈钢针电极为基底,Pt-Pb纳米颗粒作为导电修饰层,壳聚糖膜包埋葡萄糖氧化酶。检测时,葡萄糖扩散进入CS-GOD膜并被GOD催化氧化,伴随生成过氧化氢;过氧化氢在0.3 V(vs. SCE)下于电极表面发生电化学氧化,产生与葡萄糖浓度成正比的安培电流。Pt-Pb纳米颗粒具有较大比表面积和较低电荷转移电阻,可改善GOD活性中心与电极之间的电子传递,相当于电子传导隧道,从而放大电流响应。p-BQ还原消耗质子触发CS沉积,使GOD在温和条件下固定并保持活性。最终通过电化学工作站记录电流-时间曲线,实现葡萄糖的定量检测。

检测灵敏度

线性范围: 0.03–9 mM;电流灵敏度: 0.4485 μA/mM;响应时间: 15 s;KappM: 4.9837 mM;R = 0.9995

效应效果

该传感器在pH 7.0 PBS中对连续加入的葡萄糖表现出良好安培响应,线性范围为0.03–9 mM,电流灵敏度为0.4485 μA/mM,响应时间15 s,表观米氏常数4.9837 mM,表明固定化GOD仍具有较高酶活性和对葡萄糖的亲和力。Pt-Pb纳米颗粒使电荷转移电阻由裸SSN电极的1800 kΩ降至100 Ω,有效面积增至0.189 cm2,显著增强小面积针电极的电流信号。MTT细胞实验显示L929细胞相对活力为93±5%,提示电极具有较低细胞毒性。作者认为该技术可为针型葡萄糖生物传感器制备提供合适方法,适用于糖尿病血糖监测。文中未报告选择性、稳定性、重现性和实际样品回收率。

传感器的构成

  • 基底/换能器电极:不锈钢针电极(SSN electrode),直径0.35 mm,作为工作电极提供导电基底和针形植入结构。
  • 纳米材料修饰层:Pt-Pb纳米颗粒(Pt-Pb nanoparticles,PbPtx合金),电沉积于SSN表面,粒径约200–300 nm,膜厚约100 nm,用于加速电子转移、增大有效面积并降低电荷转移电阻。
  • 固定基质层:壳聚糖(CS)膜,通过p-BQ触发电沉积形成,用于包埋和固定GOD,提供生物相容性成膜环境。
  • 识别元件:葡萄糖氧化酶(GOD,EC 1.1.3.4),共电沉积于CS膜中,用于催化葡萄糖氧化并产生电化学信号。
  • 成膜触发剂:对苯醌(p-BQ),在-0.1 V下还原消耗质子,使CS局部酸化沉积,实现温和条件下GOD-CS共沉积。
  • 工作介质:磷酸盐缓冲液(PBS,0.2 M,pH 7.0),提供离子导电环境并维持酶活性。

中文摘要

本研究报道了一种针型安培葡萄糖生物传感器的制备与电化学性能。作者首先通过电沉积在不锈钢针电极(SSN)表面制备Pt-Pb纳米颗粒修饰层,得到Pt-Pb/SSN电极;随后在含对苯醌(p-BQ)、壳聚糖(CS)和葡萄糖氧化酶(GOD)的混合溶液中,以p-BQ还原消耗质子为触发,将CS-GOD生物复合膜共电沉积于Pt-Pb/SSN电极表面。电化学表征表明,Pt-Pb纳米颗粒可加速电子转移、降低电荷转移电阻并增大电极有效面积,从而改善小面积针电极的传感性能。该传感器对葡萄糖的检测范围为0.03–9 mM,电流灵敏度为0.4485 μA/mM,响应时间为15 s,表观米氏常数为4.9837 mM。细胞实验显示电极具有较低细胞毒性。该工作为针型葡萄糖生物传感器的制备提供了可行技术。

英文摘要

A glucose biosensor was fabricated by electrodepositing chitosan (CS)-glucose oxidase(GOD) biocomposite onto the stainless steel needle electrode (SSN electrode) modified by Pt-Pb nanoparticles (Pt-Pb/SSN electrode). Firstly, Pt-Pb nanoparticles were deposited onto the SSN electrode and then CS-GOD biocomposite was co-electrodeposited onto the Pt-Pb/SSN electrode in a mixed solution containing p-benzoquinone (p-BQ), CS and GOD. The electrochemical results showed that the Pt-Pb nanoparticles can accelerate the electron transfer and improve the effective surface area of the SSN electrode. As a result, the detection range of the proposed biosensor was from 0.03 to 9 mM with a current sensitivity of 0.4485 μA/mM and a response time of 15 s. The Michaelis constant value was calculated to be 4.9837 mM. The cell test results indicated that the electrodes have a low cytotoxicity. This work provided a suitable technology for the fabrication of the needle-type glucose biosensor.