组成图示
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传感器类型
其他（19F NMR/MRI 生物传感器）
检测对象
糖蛋白（glycoproteins，如去唾液酸 fetuin/ASF、卵白蛋白/OVA）；样品基质：HEPES 缓冲液/19F MRI 体模
检测原理
CongII 凝集素通过糖结合口袋特异性识别 ASF、OVA 等半乳糖基糖蛋白。位点特异性引入的 19F 酰基供体 2 在 Tyr51 形成 2-CongII，未结合时 19F NMR 呈尖锐单峰。糖蛋白结合后，2-CongII 与糖蛋白形成约 100 kDa 的大分子复合物，表观分子量显著增大；基于 19F 化学位移各向异性，横向弛豫时间 T2 由 0.34 s 缩短至 0.14 s，导致 19F NMR 峰变宽、19F MRI 信号降低。小分子乳糖结合仅使复合物约 30 kDa，T2 变化小，峰保持尖锐；过量乳糖竞争结合后 T2 恢复至 0.62 s，信号恢复。该 turn-off 机制实现糖蛋白与小分子糖类的区分。
检测灵敏度
原文未报告 LOD、线性范围、灵敏度斜率或 R^2。
效应效果
该传感器对半乳糖基糖蛋白 ASF 和 OVA 均产生明显 19F NMR 峰变宽与 19F MRI 信号降低，而对甘露糖丰富的 RiboB 和非糖蛋白大分子 β-Gal 无明显影响，显示良好选择性。ASF 结合使 T2 从 0.34 s 降至 0.14 s，过量乳糖竞争后恢复至 0.62 s，证明结合可逆且信号可恢复。19F MRI 体模中，ASF 使 2-CongII 信号降至背景水平，乳糖处理后恢复；RiboB 不改变信号。原文未报告 RSD、稳定性、回收率或与 ELISA/HPLC/qPCR 的定量对比，但作者认为该 turn-off 型 19F 生物传感器可用于糖蛋白成像及蛋白-蛋白相互作用检测。
传感器的构成
- 识别/换能蛋白：CongII 凝集素（半乳糖结合蛋白，提供糖识别位点并承载 19F 探针）
- 位点特异性修饰催化剂：AGD 试剂 1（乳糖-DMAP 亲和引导催化剂，催化酰基转移至糖结合口袋 Tyr51）
- 19F 信号标记物：酰基供体 2（3,5-双(三氟甲基)苯基硫酯，含 6 个磁等价 19F，形成 2-CongII）
- 竞争/恢复配体：乳糖（Lactose，竞争 CongII 糖结合位点，使 19F 信号恢复）
- 检测介质：50 mM HEPES 缓冲液（pH 8.0，0.2 mM TFA；NMR 含 10% D2O）
- 19F 内标：TFA（三氟乙酸，约 -75.6 ppm，用于 MRI 参照）
- 识别对象：ASF/OVA 等半乳糖基糖蛋白（结合后形成大分子复合物并改变 19F T2）
中文摘要
本研究利用亲和引导 DMAP（AGD）策略，构建了一种新型 19F 标记凝集素生物传感器，用于糖蛋白的特异性检测与成像。以鳗鱼皮肤黏液来源的半乳糖结合凝集素 CongII 为模型蛋白，设计含乳糖识别基团和 DMAP 酰基转移催化基团的 AGD 试剂，将含 3,5-双(三氟甲基)苯基的 19F 酰基供体位点特异性引入 CongII 糖结合口袋 Tyr51 位点，形成具有尖锐 19F NMR 信号的 2-CongII。当 2-CongII 与去唾液酸 fetuin（ASF）或卵白蛋白（OVA）等半乳糖基糖蛋白结合时，复合物表观分子量增大，19F 化学位移各向异性导致横向弛豫时间 T2 缩短，19F NMR 峰明显变宽，19F MRI 信号降低；而小分子乳糖结合不引起显著变化，过量乳糖可竞争恢复信号。该 turn-off 型传感器可区分糖蛋白与小分子糖类，并可用于 19F MRI 体模成像。
英文摘要
In this study, assisted by affinity-guided DMAP strategy, we developed a novel (19)F-modified lectin as a biosensor for specific detection and imaging of glycoproteins. Exploited the large chemical shift anisotropy property of (19)F nuclei, glycoproteins detected by our (19)F-biosensor are signatured by broadened peaks in (19)F NMR, hence enabled the distinction between glycoproteins and small molecule saccharides. Such signal on/off switching was also applied to glycoprotein imaging by (19)F MRI.