其他(微悬臂梁生物传感器) 2011

Microcantilevers modified by specific peptide for selective detection of trimethylamine.

Biosensors & bioelectronics Huang X, Li M, Xu X, Chen H, Ji HF, Zhu S
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组成图示

Microcantilevers modified by specific... 传感器构成示意图

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传感器类型

其他(微悬臂梁生物传感器)

检测对象

三甲胺(trimethylamine, TMA);样品基质:0.01 M磷酸盐缓冲液(水溶液/海鲜样品裂解液)

检测原理

含巯基肽经N端Cys与金膜形成Au–S键,在微悬臂梁金面自组装成单分子层。TMA与肽中谷氨酸(Glu)的COO−基团相互作用,其他氨基酸提供特定二级结构,实现选择性识别。结合后释放肽分子间COO−排斥,使肽层收缩并产生表面应力变化,导致硅微悬臂梁向金面弯曲;平衡弯曲幅度随TMA浓度增大,在8–800 ppm内响应。激光从金面反射至四象限位置敏感探测器(PDD),将弯曲位移转换为表面应力信号。吸附动力学符合Langmuir模型,k为0.23 s−1,无额外信号放大。

检测灵敏度

LOD: approximately 8 ppm;动态范围: 8 ppm–800 ppm

效应效果

该传感器对TMA选择性高,对组胺(HI)、黄嘌呤(HX)、丙酮、乙醇、乙酸乙酯、DMF、甲醇、甲苯、己烷和氯仿无或仅轻微响应。800 ppm TMA及800 ppm TMA+800 ppm HI+800 ppm HX混合体系中,表面应力变化分别为0.035±0.005 N/m和0.040±0.006 N/m,HI和HX无显著干扰。未修饰微悬臂梁对800 ppm TMA无响应。同一传感器重复测量标准偏差小于5%,五个不同传感器间标准偏差小于15%。传感器在4℃缓冲液或室温干燥保存超过1个月仍保持相似响应。相比GC、HPLC、IMS和MS,该传感器更小型化、低成本,适合现场分析;相比羧酸修饰微悬臂梁选择性显著提高,可用于食品腐败、环境监测和医学诊断。

传感器的构成

  • 基底/换能器:硅微悬臂梁(Si MCL,CSC12,90 μm×35 μm×1.0 μm),承载表面应力并产生可测弯曲
  • 粘附层:铬(Cr,20 nm),提高金膜与二氧化硅/硅表面的附着
  • 金属修饰层:金(Au,20 nm),提供Au–S自组装界面并反射激光用于光学读取
  • 识别元件:特异性肽(Cys-Pro-Ser-Ala-Asn-Asn-Ser-Thr-Val-Lys-Glu-Gly-Cys-Gly),N端Cys经Au–S键自组装,选择性结合TMA
  • 识别界面:肽单分子层(SAM),通过Glu的COO−与TMA相互作用产生表面应力变化
  • 样品介质:0.01 M磷酸盐缓冲液(PB,pH 7.0),流动样品基质,维持肽构象
  • 信号读出:四象限AFM激光位移检测系统(laser + PDD),将MCL弯曲转换为表面应力信号

中文摘要

本文报道了一种基于微悬臂梁(MCL)并修饰特异性肽的生物传感器,用于高选择性检测三甲胺(TMA)。该传感器利用肽功能化微悬臂梁在结合TMA后发生弯曲的机制:TMA与肽表面识别位点结合后改变表面应力,使悬臂梁产生可测形变。传感器对TMA具有选择性响应,平衡弯曲幅度与TMA浓度相关,动态范围为8–800 ppm,检出限约为8 ppm。同一传感器重复测量标准偏差为5%,不同传感器之间标准偏差为15%,表明其具有良好重复性。TMA是室温下具有鱼腥和氨味的气体,是海鲜腐败的重要指标,也与环境监测和医学诊断相关。传统GC、HPLC、IMS和MS方法设备昂贵且复杂,不适合现场分析。该工作将含巯基肽自组装到金膜微悬臂梁上,通过光学梁偏转法读取弯曲,为食品腐败、环境及医学检测提供了一种小型化、低成本、高选择性的传感方案。

英文摘要

We report a biosensor based on a microcantilever that is modified by a specific peptide for highly selective detection of trimethylamine (TMA). The assay is based on binding-induced bending of the peptide functionalized microcantilevers. The sensor is selectively responsive to TMA. The amplitude of microcantilever bending at equilibrium is a function of the concentration of TMA with a dynamic range from 8 ppm to 800 ppm. The detection limit is approximately 8 ppm. There is a good intra-sensor and an acceptable inter-sensor reproducibility as evidenced by the standard deviation of 5% and 15%, respectively.