其他(双偏振干涉仪(DPI)生物传感器) 2012

Dual polarisation interferometry for real-time, label-free detection of interaction of mercury(II) with mercury-specific oligonucleotides.

Chemical communications (Cambridge, England) Wang Y, Zheng Y, Yang F, Yang X
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组成图示

Dual polarisation interferometry for ... 传感器构成示意图

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传感器类型

其他(双偏振干涉仪(DPI)生物传感器)

检测对象

汞(II)离子(Hg2+),水溶液/缓冲液(原文未明确实际样品基质;文中提及WHO饮用水限值)

检测原理

该传感器以固定于PEI层上的富胸腺嘧啶寡核苷酸MSO为识别元件。当Hg2+进入界面时,Hg2+与MSO中的胸腺嘧啶形成T–Hg2+–T配位错配,使原本随机卷曲的单链MSO转变为较刚性的发夹样构象。这一识别事件引起表面层厚度增加、质量增加和折射率轻微变化。DPI基于倏逝波干涉原理,实时、无标记地监测传感表面质量、折射率和厚度变化,从而将Hg2+结合转化为可定量光学信号。质量增量随Hg2+浓度在0.1–3.0 mM范围内线性增加,并可通过结合曲线计算结合动力学常数。

检测灵敏度

LOD: 27 nM (S/N = 3);线性范围: 0.1–3.0 mM;拟合方程: M (ng mm−2) = 0.013 c (mM) + 0.009;斜率: 0.013 ng mm−2 mM−1;r = 0.998

效应效果

该传感器表现出对Hg2+的高选择性:对照cMSO/PEI层在加入Hg2+后质量变化很小;Mg2+、Ca2+、Mn2+、Fe3+、Cd2+、Co2+、Ni2+、Zn2+和Pb2+单独存在时仅引起轻微或可忽略的质量变化,混合金属离子与Hg2+共存时质量变化较单独Hg2+降低,说明其他离子存在可能使检出限升高。DPI芯片经氧化性piranha清洗液处理后可重复使用。方法获得ka=1.92×10^4 M−1 s−1、kd=0.014 s−1、Ka=1.4×10^6 M−1,LOD为27 nM,接近WHO饮用水Hg2+限值30 nM。原文未报告RSD、实际样品回收率或与ELISA/HPLC/qPCR的对比。作者认为该策略可扩展至其他功能DNA识别目标。

传感器的构成

  • 基底/换能器:硅氮氧化物芯片(silicon oxynitride chip),负电表面,作为DPI倏逝波传感基底
  • 修饰层:聚乙亚胺(PEI),高电荷聚阳离子,静电自组装形成正电层以固定寡核苷酸
  • 识别元件:21-mer富胸腺嘧啶寡核苷酸(MSO,5'-TTC TTT CTT CCC TTG TTT GTT-3'),通过T–Hg2+–T配位识别Hg2+
  • 被测物:汞(II)离子(Hg2+),与MSO中胸腺嘧啶配位并诱导构象变化
  • 信号读出:双偏振干涉仪(DPI),实时监测表面层厚度、质量和折射率变化

中文摘要

本文报道了一种基于双偏振干涉仪(DPI)的实时无标记检测技术,用于研究汞(II)离子(Hg2+)与21-mer富胸腺嘧啶寡核苷酸(MSO)的相互作用,并构建Hg2+生物传感器。该传感器利用胸腺嘧啶–Hg2+–胸腺嘧啶(T–Hg2+–T)配位化学,使MSO在Hg2+存在下由随机卷曲单链转变为发夹样构象。实验将高电荷聚阳离子聚乙亚胺(PEI)静电自组装到负电硅氮氧化物芯片表面,再静电吸附带负电MSO。DPI实时监测表面层厚度、质量和折射率变化,获得结合速率常数ka=1.92×10^4 M−1 s−1、解离速率常数kd=0.014 s−1和结合常数Ka=1.4×10^6 M−1。质量增量与Hg2+浓度在0.1–3.0 mM范围内线性,检出限为27 nM(S/N=3),接近WHO饮用水Hg2+限值30 nM。对照寡核苷酸cMSO及其他金属离子实验表明该传感器具有较高选择性,且DPI芯片可重复使用。

英文摘要

A real-time, label-free dual polarisation interferometry technique was used to investigate the interaction of Hg(2+) with a 21-mer T-rich oligonucleotide and further construct a Hg(2+) biosensor based on thymine-Hg(2+)-thymine coordination chemistry.