传感器类型
电化学生物传感器
检测对象
L-乳酸(L-lactic acid,L-lactate);样品基质:磷酸盐缓冲溶液(PBS, pH 7.4),文中提及可用于适当稀释的血样
检测原理
该传感器以乳酸氧化酶(LOD)为识别元件。LOD 催化 L-乳酸与溶解氧反应生成丙酮酸和过氧化氢(H2O2)。在固定电位(约 800 mV)下,H2O2 在金电极表面发生氧化反应,释放电子并产生安培电流。ZnO 纳米四足具有三维网络结构和大比表面积,可通过静电吸附负载更多 LOD,同时提供多端电荷转移通道,促进酶活性位点与电极之间的电子传递以及 PBS 中离子交换;Nafion 膜起保护和固定酶的作用。随着 L-乳酸浓度升高,催化生成的 H2O2 增多,电极氧化电流随之增大,从而实现定量检测。
检测灵敏度
LOD: 1.2 mM;线性范围: 3.6 mM–0.6 mM;灵敏度: 28.0 mA cm−2 mM−1;R^2 = 0.9952
效应效果
该传感器响应较快,加入 L-乳酸后平均 10 s 内达到最大稳态电流的 90%。灵敏度测定重复性为 n = 3,RSD = 4.9%。稳定性方面,电极在 4 °C 保存并连续使用 34 次后,CV 电流无明显下降。与表 1 中其他 L-乳酸电化学传感器相比,其灵敏度(28.0 mA cm−2 mM−1)高于 Pt–Ag/AgCl 薄膜(0.07)、氢钛酸盐纳米管(0.24)、多壁碳纳米管/铂纳米粒子(6.36)、碳纤维微电极(9.15)和水凝胶光刻电极阵列(1.1)等报道值。作者认为该传感器结构简单、成本低,低检出限和较低线性范围适合微量分析,可用于适当稀释血样中乳酸检测以反映人体健康状况。
传感器的构成
- 基底电极:金电极(Au electrode),直径 2 mm,作为工作电极与电荷换能基底
- 底层修饰层:Nafion(5 wt%)溶液滴涂于 Au 表面,形成初始修饰层
- 纳米吸附层:ZnO 纳米四足(ZnO nanotetrapods)分散液滴涂干燥,形成三维网络,提供多端电荷转移通道
- 识别元件:乳酸氧化酶(LOD,lactate oxidase)通过静电吸附固定于 ZnO 表面,催化 L-乳酸氧化
- 保护层:Nafion 滴涂于 LOD/ZnO/Au 表面干燥,形成保护膜并固定酶
- 反应介质:0.1 M PBS(pH 7.4)与溶解 O2,提供酶催化反应环境
- 信号产物:H2O2,由 LOD 催化 L-乳酸与 O2 生成并在电极表面氧化产生电流
- 检测系统:三电极体系(Pt 辅助电极、Ag/AgCl 参比电极)与电化学工作站(Solartron SI 1287),用于 CV 和安培测量
中文摘要
本文报道了一种基于氧化锌(ZnO)纳米四足结构的安培型电化学生物传感器,用于检测 L-乳酸。乳酸氧化酶(LOD)通过静电吸附方式固定在 ZnO 纳米四足表面。与传统检测器不同,具有四条腿的独立 ZnO 纳米结构作为酶吸附层,可提供多端电荷转移通道;同时,大量 ZnO 纳米四足随机堆叠自然形成三维网络结构,有利于磷酸盐缓冲溶液中电子和离子的传输。安培响应测量结果表明,该 ZnO 纳米四足 L-乳酸生物传感器的检出限为 1.2 mM,表观 Michaelis–Menten 常数为 0.58 mM,灵敏度为 28.0 mA cm−2 mM−1,并在 3.6 mM–0.6 mM 范围内对 L-乳酸浓度呈现良好线性响应。研究说明,基于 ZnO 四足纳米结构的生物传感器具有较高灵敏度和快速响应能力,可用于乳酸检测。
英文摘要
An amperometric biosensor based on zinc oxide (ZnO) nanotetrapods was designed to detect L-lactic acid. The lactate oxidase was immobilized on the surface of ZnO nanotetrapods by electrostatic adsorption. Unlike traditional detectors, the special four-leg individual ZnO nanostructure, as an adsorption layer, provides multiterminal charge transfer channels. Furthermore, a large amount of ZnO tetrapods are randomly stacked to form a three-dimensional network naturally that facilitates the exchange of electrons and ions in the phosphate buffer solution. Utilizing amperometric response measurements, the prepared ZnO nanotetrapod L-lactic acid biosensor displayed a detection limit of 1.2 μM, a low apparent Michaelis-Menten constant of 0.58 mM, a high sensitivity of 28.0 μA cm(-2) mM(-1) and a good linear relationship in the range of 3.6 μM-0.6 mM for the L-lactic acid detection. This study shows that the biosensor based on ZnO tetrapod nanostructures is highly sensitive and able to respond rapidly in detecting lactic acid.