其他(电阻式生物传感器) 2012

The biochemiresistor: an ultrasensitive biosensor for small organic molecules.

Angewandte Chemie (International ed. in English) Lai LM, Goon IY, Chuah K, Lim M, Braet F, Amal R, Gooding JJ
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组成图示

The biochemiresistor: an ultrasensiti... 传感器构成示意图

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传感器类型

其他(电阻式生物传感器)

检测对象

恩诺沙星(enrofloxacin);样品基质:PBS缓冲液、牛奶

检测原理

该传感器基于抗体置换改变纳米颗粒间距的电阻式检测原理。金包覆磁性纳米颗粒(Au@MNPs)表面修饰巯基乙醇胺自组装单分子层,并共价结合恩诺沙星作为表位;抗恩诺沙星IgM抗体结合后形成Ab-Au@MNPs,使颗粒间形成较厚的蛋白绝缘层,磁组装在叉指电极(IDEs)上时电阻较高。样品中的恩诺沙星与表面恩诺沙星竞争结合抗体,导致部分抗体从颗粒表面解离,颗粒间距减小。根据R=R0e^{-βd},间距减小使电子隧穿/渗流电导增加,IDE间电阻降低;分析物浓度越高,抗体置换越多,电阻下降越明显。磁组装保证颗粒在电极间隙形成连续导电网络,40 min内达到响应。

检测灵敏度

LOD: 0.28 fM;检测范围: 2.8 µM–0.28 fM;牛奶基质 LOD: 2.8 pM;牛奶检测范围: 1 nM–1 pM

效应效果

该传感器表现出良好选择性与抗污性:BSA和抗生物素IgG处理后电阻分别为214±19 Ω和350±89 Ω,接近无蛋白的212±20 Ω,而抗恩诺沙星抗体结合后升至2.30×10^7±1.7×10^6 Ω。响应时间为40 min。缓冲液中检测限0.28 fM,比平面法拉第电化学(30 pM)低10^6倍,并优于HPLC(310 nM)、免疫分析(3 nM)和LC-MS(1 nM)。牛奶中检测范围为1 nM–1 pM,检测限2.8 pM;未知加标牛奶测得21.9±3.7 pg/mL,与ELISA的23.24±3.4 pg/mL一致。无需样品前处理,作者认为其适用于复杂生物基质中小分子快速检测。

传感器的构成

  • 换能器电极:叉指电极(IDEs),间隙5 µm,提供电阻测量通路
  • 传感纳米颗粒:金包覆磁性纳米颗粒(Au@MNPs,平均直径100 nm),磁组装形成电阻网络
  • 自组装单分子层:巯基乙醇胺(mercaptoethanolamine)SAM,修饰Au@MNPs表面并提供氨基
  • 识别配体:恩诺沙星(enrofloxacin),经碳二亚胺偶联到氨基SAM,作为抗体结合表位
  • 识别元件:抗恩诺沙星IgM抗体(anti-enrofloxacin IgM),结合表面恩诺沙星形成Ab-Au@MNPs,增大颗粒间距
  • 信号读出:电阻计/电压表(voltmeter),测量IDE间电阻变化

中文摘要

本文提出一种新型生物传感器——生物化学电阻器(biochemiresistor),可在生物样品中实现极低检测限、快速响应和良好特异性。传统化学电阻器通过小分子进入纳米颗粒膜并增大颗粒间距引起电阻变化来检测分析物,但选择性有限;而大尺寸生物识别元件难以进入纳米颗粒间隙。作者将生物识别与电阻测量在时间和空间上分离,采用抗体修饰的金包覆磁性纳米颗粒(Ab-Au@MNPs),并在叉指电极(IDEs)上磁组装成纳米颗粒膜。表面恩诺沙星作为表位结合抗恩诺沙星IgM抗体,样品中恩诺沙星竞争置换抗体,使颗粒间距减小、电阻降低。该传感器对恩诺沙星的检测限为0.28 fM,比平面法拉第电化学低10^6倍,并优于HPLC、免疫分析和LC-MS;牛奶中检测限为2.8 pM,与ELISA结果一致,无需样品前处理,40 min完成检测。

英文摘要

New sensation: A resistance-based biosensor uses gold-coated magnetic nanoparticles (Au@MNPs) functionalized with the antibiotic enrofloxin (see picture; purple), which bind to anti-enrofloxin as analyte (blue). The Au@MNPs can be magnetically assembled between electrodes, and the measured resistance R is a function of analyte concentration.