A ligation-triggered highly sensitive fluorescent assay of adenosine triphosphate based on graphene oxide.

荧光生物传感器

ATP（adenosine triphosphate，三磷酸腺苷）；样品基质：溶液样品（未明确实际生物基质）

该传感器利用ATP依赖的T4 DNA连接酶反应和GO对不同DNA结构的吸附差异实现荧光检测。FAM标记模板T1与P1、P2杂交形成带缺口的DNA双链。当存在ATP时，T4 DNA连接酶以ATP为辅因子催化缺口连接，生成热稳定的无缺口双链；45°C热变性后仍保持双链，难以被GO吸附，FAM荧光保留，信号增强。当ATP不足或不存在时，连接反应不发生，热变性使双链解离为单链DNA，GO选择性吸附单链DNA并猝灭FAM荧光，信号降低。因此520 nm荧光强度随ATP浓度升高而增强，无需核酸扩增即可实现高灵敏检测。

LOD: 0.3 nM；线性范围: 0.5–100 nM；斜率: 5.065；线性方程: F = 5.065C + 274.9；R^2 = 0.995

该传感器对ATP具有较高选择性：在200 nM腺苷（A）、ADP、AMP、CTP、GTP和UTP存在下，荧光响应均很弱，明显低于ATP的强响应，说明可区分ATP与其类似物。方法无需扩增，操作简便，线性范围为0.5–100 nM，检出限0.3 nM，比先前扩增适配体法低两个数量级，并与连接触发DNAzyme级联扩增荧光检测相当。论文报告三次重复实验的标准偏差，但未给出RSD、稳定性或实际样品加标回收数据。作者认为该策略快速、简便、灵敏且选择性好，可用于生化研究和临床诊断中的ATP检测。

本文报道了一种基于氧化石墨烯（GO）和ATP依赖酶促反应（ATP-DER）的简单、无扩增、高灵敏荧光生物传感器，用于检测三磷酸腺苷（ATP）。传感体系由带缺口的DNA双链和GO组成：FAM标记的模板T1与半探针P1、P2杂交形成含单链缺口的DNA双链底物。在T4 DNA连接酶和ATP存在下，缺口被连接为稳定的无缺口双链，该双链对GO亲和力弱，热变性后仍保持双链结构，FAM荧光不被GO猝灭，产生强荧光信号；无ATP时连接反应不发生，热变性后释放单链DNA，被GO吸附并猝灭FAM荧光，信号较弱。荧光强度与ATP浓度成正比。该方法无需信号扩增，操作简便，在0.5–100 nM范围内线性良好，检出限为0.3 nM，并能有效区分ATP与腺苷、ADP、AMP、CTP、GTP和UTP等类似物，具有较高选择性和应用潜力。