组成图示
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传感器类型
全细胞生物传感器
检测对象
N-酰基高丝氨酸内酯（N-acyl homoserine lactone, AHL）、N-十二酰基高丝氨酸内酯（C12-HSL）；样品基质为健康人舌后背面细菌培养上清提取物（酸化乙酸乙酯提取、乙腈溶解）
检测原理
检测基于全细胞基因表达生物传感器。Enterobacter sp. T1-1培养上清中的长链AHL（C12-HSL）扩散进入A. tumefaciens NTL4(pZLR4)细胞，被pZLR4质粒携带的AHL响应调控元件识别并激活，诱导下游报告基因表达β-半乳糖苷酶。β-半乳糖苷酶水解培养基中的X-gal，生成蓝色不溶产物，在平板上形成蓝色斑点或使菌苔显蓝色。AHL浓度越高，报告酶诱导越强，蓝色越深，因此可定性或半定量反映长链AHL存在。该体系无纳米材料放大，主要依靠细菌基因表达实现信号放大；高分辨质谱用于确认C12-HSL的分子质量与碎片结构。
检测灵敏度
原文未报告LOD、线性范围、灵敏度斜率或相关系数。
效应效果
文中未报告LOD、线性范围、RSD或加标回收率。生物传感器A. tumefaciens NTL4(pZLR4)在交叉划线和点样实验中均被T1-1培养上清提取物激活，出现蓝色显色，表明其对长链AHL具有选择性响应。高分辨质谱进一步确认提取物中存在C12-HSL，母离子m/z 284.2208，MS/MS碎片m/z 95.0822和109.1003符合内酯结构，增强了鉴定可靠性。作者强调这是首次从人舌后背面分离到AHL产生的肠杆菌属菌株，将口腔细菌群体感应研究从AI-2扩展到AHL，有助于理解口腔细菌定植、生物膜形成和潜在抗群体感应干预。
传感器的构成
- 支撑培养基：AB琼脂（含K2HPO4、KH2PO4、NH4Cl、MgSO4·7H2O、KCl、CaCl2、FeSO4·7H2O和bacto-agar），用于培养生物传感器菌苔
- 报告细胞层：根癌农杆菌Agrobacterium tumefaciens NTL4(pZLR4)，作为全细胞换能器，响应长链AHL并表达报告酶
- 识别元件：pZLR4质粒携带的AHL响应调控元件，识别长链N-酰基高丝氨酸内酯（AHL）并启动报告基因表达
- 信号底物：X-gal，被诱导表达的β-半乳糖苷酶水解后生成蓝色不溶产物
- 样品层：Enterobacter sp. T1-1培养上清经酸化乙酸乙酯（ethyl acetate）提取、乙腈（acetonitrile）溶解后的C12-HSL提取物
- 培养条件：检测用AB琼脂不含gentamicin并含20 µg/mL X-gal；LB培养基用50 mM MOPS缓冲至pH 5.5，防止AHL内酯环开环
中文摘要
本文报道从健康人舌后背面分离到一株能产生N-酰基高丝氨酸内酯（AHL）的肠杆菌属菌株T1-1。该菌株培养上清提取物可激活生物传感器根癌农杆菌Agrobacterium tumefaciens NTL4(pZLR4)，提示其产生长链AHL。高分辨质谱分析证实，T1-1产生N-十二酰基高丝氨酸内酯（C12-HSL），母离子m/z为284.2208，MS/MS碎片m/z 95.0822和109.1003符合内酯结构。据作者所知，这是首次从人舌后背面分离到肠杆菌属T1-1并证明其产生AHL。该结果扩展了口腔细菌群体感应研究，表明口腔细菌不仅使用自诱导物-2（AI-2），也可使用AHL信号分子，为理解口腔细菌定植和群体感应调控提供依据。
英文摘要
We report the isolation of N-acyl homoserine lactone-producing Enterobacter sp. isolate T1-1 from the posterior dorsal surfaces of the tongue of a healthy individual. Spent supernatants extract from Enterobacter sp. isolate T1-1 activated the biosensor Agrobacterium tumefaciens NTL4(pZLR4), suggesting production of long chain AHLs by these isolates. High resolution mass spectrometry analysis of these extracts confirmed that Enterobacter sp. isolate T1-1 produced a long chain N-acyl homoserine lactone, namely N-dodecanoyl-homoserine lactone (C12-HSL). To the best of our knowledge, this is the first isolation of Enterobacter sp., strain T1-1 from the posterior dorsal surface of the human tongue and N-acyl homoserine lactones production by this bacterium.