综述或非传感器论文 2009 非传感器论文

Effect of various parameters on viability and growth of bacteria immobilized in sol-gel-derived silica matrices.

Applied microbiology and biotechnology
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组成图示

Effect of various parameters on viabi... 传感器构成示意图

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传感器类型

综述或非传感器论文

检测对象

无(非传感检测);研究体系:大肠杆菌 E. coli ATCC 8739,样品基质:LB 培养基、磷酸盐缓冲液、溶胶-凝胶二氧化硅基质。

检测原理

本文未建立传感信号,而是采用微生物学方法评估固定化菌存活。将 E. coli 与二氧化硅溶胶混合,经柠檬酸或 HCl 酸化形成溶胶-凝胶二氧化硅基质,使活菌包埋于多孔网络中。随后改变生长状态、细胞密度、NaCl 渗透压、相容溶质和碳氮营养物,考察包埋菌的存活与增殖。取出约 200 mg 凝胶,破碎并稀释后涂布 LB 平板,37°C 培养 48 h,统计菌落形成单位 cfu。cfu 随保存时间、基质前驱体、凝胶化酸、营养物和渗透压变化,反映固定化菌的生理状态;柠檬酸凝胶和同时提供碳氮源可延长存活,单独碳源导致氮饥饿死亡。

检测灵敏度

无(原文未报告 LOD、线性范围、灵敏度斜率或相关系数)

效应效果

不同生长状态固定化10天后存活无显著差异,初始约3×10^8 cfu,10天后约4×10^7 cfu。低密度(<10^9 cfu)包埋数接近初始;10^12 cfu时凝胶计数不超过10^9 cfu/gel;LB中低密度可增殖至约10^7 cfu/gel。TEOS基质中,添加甘油、甘露醇、海藻糖45天后无计数菌,550天仍无;无添加且经NaCl处理者550天约10^5 cfu。0.6 M NaCl使胞内海藻糖约3倍,但550天存活无显著差异。仅葡萄糖45天无存活;LB或葡萄糖+硫酸铵可维持45天存活。柠檬酸凝胶4°C保存550天存活比HCl高约两个数量级,20°C也显著更高(p=0.0131)。作者认为可用于生物传感器或生物反应器活菌保存。

传感器的构成

  • 非传感器体系:本文未报道传感器,仅研究溶胶-凝胶二氧化硅固定化大肠杆菌
  • 基底/基质:SiO2、硅酸钠或 TEOS 溶胶-凝胶,形成多孔二氧化硅载体
  • 生物元件:E. coli ATCC 8739,作为固定化活菌
  • 营养/调节层:LB 培养基、葡萄糖、(NH4)2SO4 等碳氮源,维持存活
  • 保护剂:甘油、甘露醇、海藻糖等相容溶质,评估渗透保护
  • 凝胶化剂:柠檬酸或 HCl,调节 pH 6.50 促进硅凝胶化
  • 读出方法:LB 平板计数 cfu,评估存活(非传感信号)

中文摘要

固定化细菌被广泛用于代谢物生产、生物催化和生物传感器构建,但其长期存活与代谢活性受生理状态、高渗环境、多孔结构及基质收缩等因素影响。本研究系统评估了多种参数对溶胶-凝胶二氧化硅基质中固定化大肠杆菌的影响,包括不同生长状态培养物的固定化应激、细胞密度以及细菌在基质内增殖能力。结果表明,在 LB 培养基存在下,以 1×10^7 cfu/gel 的优化菌量并使用水合硅前驱体时,可获得更长的保存时间。进一步考察渗透压诱导的胞内海藻糖积累及外源渗透调节剂的作用,发现添加甘油、甘露醇或海藻糖会缩短保存时间,而受压细胞内海藻糖积累本身并不改变固定化菌存活。营养物添加实验表明,仅提供碳源而不提供氮源对固定化大肠杆菌有害;当碳源和氮源同时存在时,细菌可存活更长时间。

英文摘要

关键词

大肠杆菌固定化溶胶-凝胶二氧化硅细菌存活渗透压相容溶质营养物