其他(干涉局域表面等离子共振 iLSPR 生物传感器) 2009

An interference localized surface plasmon resonance biosensor based on the photonic structure of Au nanoparticles and SiO2/Si multilayers.

ACS nano Hiep HM, Yoshikawa H, Saito M, Tamiya E
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组成图示

An interference localized surface pla... 传感器构成示意图

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传感器类型

其他(干涉局域表面等离子共振 iLSPR 生物传感器)

检测对象

亲和素(avidin);样品基质:PBS 缓冲液/微流控样品流

检测原理

该传感器利用金纳米颗粒的局域表面等离子共振(LSPR)与 SiO2/Si 多层膜形成的 Fabry-Perot 干涉耦合。金纳米颗粒层固定在 SiO2/Si 基底上,周围介质或表面结合分子改变局部折射率时,LSPR 宽带发生移动,并与干涉条纹相位匹配条件耦合,使反射光谱中 LSPR 附近暗带的相对反射率 RR=I1/I2 发生明显变化。定义 ΔRR=处理后 RR-处理前 RR 作为信号。金表面经氨基烷硫醇和生物素功能化后,亲和素与生物素特异性结合,使界面折射率增加,ΔRR 随亲和素浓度升高而增大。微流控芯片使样品连续流过传感面,UV-vis 反射光谱实时读出结合过程,实现无标记检测。

检测灵敏度

原文未报告 LOD、线性范围、灵敏度斜率或相关系数;仅报告不同亲和素浓度下平均 ΔRR:0 μg/mL=0.0025,1 μg/mL=0.008,10 μg/mL=0.031,100 μg/mL=0.044。

效应效果

该传感器在 PBS 中经 BSA 封闭后,非特异吸附引起的 ΔRR 仅 0.006,表明封闭有效;无亲和素缓冲液仅有轻微 ΔRR,主要来自物理吸附而非特异结合。亲和素结合信号随浓度增加,0、1、10、100 μg/mL 的平均 ΔRR 分别为 0.0025、0.008、0.031、0.044,每个浓度重复三次,但原文未报告 RSD、LOD、线性范围、回收率或与 ELISA/qPCR 等方法的定量对比。10 μg/mL 亲和素约 15 min 达到渐近平衡,显示实时监测能力。作者认为该 iLSPR 结构将宽 LSPR 带移动转化为较大反射率变化,并因 Fabry-Perot 多次光相互作用增强信号,具有开发微流控无标记生物传感器用于抗原抗体、DNA 杂交等应用的潜力。

传感器的构成

  • 基底/换能器:SiO2/Si 多层光子薄膜,SiO2 层约500 nm,Si 基底,形成 Fabry-Perot 干涉腔并提供反射光谱条纹
  • 硅烷化修饰层:3-氨基丙基三甲氧基硅烷(APTES)处理 SiO2 表面,引入氨基以固定金纳米颗粒
  • 等离子体纳米层:50 nm 金纳米颗粒(Au NPs)单层,体积分数约21.4%,产生 LSPR 并与干涉耦合,作为传感界面
  • 识别/功能化层:11-氨基-1-十一烷硫醇盐酸盐自组装在金表面,提供氨基反应位点
  • 生物素固定层:磺基琥珀酰亚胺 1-D-生物素与氨基反应,将生物素共价固定于表面
  • 封闭剂:PBS 中 10 μg/mL 牛血清白蛋白(BSA),抑制非特异吸附
  • 微流控通道:PDMS 微流控芯片,通道 200 μm 宽、300 μm 高、20 mm 长,腔直径 2 mm、高 300 μm,用于样品流动
  • 光学读出:UV-vis 分光光度计与光纤探头测量 400–900 nm 反射光谱,计算 RR 和 ΔRR

中文摘要

本文报道了一种基于等离子体金纳米颗粒与二氧化硅/硅(SiO2/Si)光子薄层多层结构的干涉局域表面等离子共振(iLSPR)纳米结构,并通过实验反射光谱和数值模拟对其光学传感特性进行分析。该结构将约50 nm厚的金纳米颗粒单层固定在约500 nm厚的SiO2/Si基底上,使金纳米颗粒的局域表面等离子共振与SiO2/Si界面形成的Fabry-Perot干涉条纹发生耦合。当周围介质折射率变化时,反射光谱中LSPR附近的暗带位置和对比度发生变化,可用相对反射率RR及其变化ΔRR表征。作者采用复杂Fresnel系数结合Maxwell-Garnett有效介质理论对反射光谱进行模拟,实验与模拟结果基本一致。该基底对不同折射率溶液表现出较高敏感性,并可通过烷硫醇在金表面自组装实现功能化。进一步将其集成到PDMS微流控芯片中,以11-氨基-1-十一烷硫醇、磺基琥珀酰亚胺生物素和亲和素构建生物素-亲和素模型,在PBS中实现无标记实时监测。结果表明,BSA封闭后非特异吸附较小,亲和素结合引起的ΔRR随浓度增加,显示该结构在微流控生物传感器中的潜力。

英文摘要

This paper presents the experimental and simulation analysis of an original nanostructure design constructed with plasmonic gold nanoparticles and photonic thin-film multilayers of silicon dioxide (500 nm in thickness) and silicon on a substrate. Our nanostructure substrate showed a high sensitivity for various refractive index RI solutions and a prominent capacity for functionalizing alkanethiol molecules on the gold surface and demonstrates great potential in the development of a microfluidic-based biosensor for monitoring biotin-avidin interactions in real-time.

关键词

干涉局域表面等离子共振金纳米颗粒SiO2/Si多层膜生物素-亲和素微流控生物传感器无标记检测