电化学生物传感器 2009

A soft and flexible biosensor using a phospholipid polymer for continuous glucose monitoring.

Biomedical microdevices Chu M, Kudo H, Shirai T, Miyajima K, Saito H, Morimoto N, Yano K, Iwasaki Y, Akiyoshi K, Mitsubayashi K
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组成图示

A soft and flexible biosensor using a... 传感器构成示意图

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传感器类型

电化学生物传感器

检测对象

葡萄糖(glucose, Glc);样品基质:PBS 标准溶液,目标应用为泪液(tear fluid)。

检测原理

该传感器以 PMEH 固定 GOD 作为识别层。葡萄糖进入酶膜后,被 GOD 催化氧化,同时消耗 O2 并生成 H2O2。生成的 H2O2 扩散至 Pt 工作电极表面,在 +400 mV(vs Ag/AgCl)下发生氧化反应,产生与 H2O2 浓度成正比的安培电流。由于 H2O2 生成量与葡萄糖浓度相关,输出电流随葡萄糖浓度升高而增大。PMEH 作为磷脂聚合物,可固定 GOD、降低蛋白吸附并提高生物相容性,表面 PMEH 涂覆层还可减少酶泄漏。柔性 PDMS 基底与薄膜电极使器件可贴合眼部,实现泪液葡萄糖的连续电化学监测。

检测灵敏度

线性范围: 0.05–1.00 mmol L−1;相关系数: 0.999;灵敏度: 0.95 µA (mmol L−1)−1;校准方程: output current (mA) = 0.006 + 0.947 [glucose (mmol L−1)]。H2O2 线性范围: 0.10–2.50 mmol L−1;相关系数: 0.998;校准方程: output current (mA) = 0.312 + 7.098 [hydrogen peroxide (mmol L−1)]。

效应效果

优化条件下(GOD 38.9 units cm−2、pH 7.4、25 °C),柔性葡萄糖传感器 T95 为 41.6 s,灵敏度 0.95 µA (mmol L−1)−1,线性范围 0.05–1.00 mmol L−1,相关系数 0.999。酶膜评估中,1.0 mmol L−1 葡萄糖 T90 约 36.7 s,标准偏差 0.021 µA,CV 1.27%;pH 5.5–9.0 中 7.4 最佳,15–40 °C 中 25 °C 误差最低。H2O2 电极 T90 约 5.0 s,线性范围 0.10–2.50 mmol L−1,相关系数 0.998,误差随浓度升高增大。校准范围覆盖正常人泪液葡萄糖 0.14–0.23 mmol L−1,作者认为其柔性可贴合眼部,适用于泪液连续监测,并计划开发隐形眼镜式传感器。

传感器的构成

  • 柔性基底:PDMS(Silpot 184)膜,350 μm,提供柔性支撑与电极载体。
  • 工作电极:Pt 薄膜(200 nm),用于 H2O2 氧化安培检测。
  • 参比/对电极:Ag/AgCl 薄膜(300 nm Ag 氯化),提供稳定参比电位。
  • 固定修饰层:PMEH(MPC 与 EHMA 共聚物),固定 GOD 并提高生物相容性。
  • 识别元件:GOD(葡萄糖氧化酶),催化葡萄糖生成 H2O2。
  • 保护层:PMEH 溶液涂覆层,防止 GOD 泄漏。

中文摘要

本文报道了一种基于磷脂聚合物固定葡萄糖氧化酶(GOD)的柔性生物传感器,用于连续葡萄糖监测。首先,将 GOD 通过磷脂聚合物(2-甲基丙烯酰氧乙基磷酸胆碱与 2-乙基己基甲基丙烯酸酯共聚物,PMEH)固定于多孔聚四氟乙烯(PTFE)膜上制备酶膜,并进行安培测量评估。结果显示,GOD 固定密度优化为 38.9 units cm−2,并考察了温度和 pH 对响应的影响。随后,利用 PMEH 将 GOD 固定于柔性过氧化氢电极上,制备柔性葡萄糖传感器。该传感器在 0.05–1.00 mmol L−1 范围内输出电流与葡萄糖浓度呈线性关系,相关系数为 0.999,校准范围覆盖正常人泪液葡萄糖浓度 0.14–0.23 mmol L−1。结果表明,该柔性生物传感器有望用于泪液葡萄糖的连续监测。

英文摘要

A flexible biosensor using a phospholipid polymer to immobilization of glucose oxidase (GOD) was fabricated and tested. At first, an enzyme membrane formed by immobilizing GOD onto a porous polytetrafluoroethylene (PTFE) membrane using the phospholipid polymer (2-methacryloyloxyethyl phosphorylcholine (MPC) copolymerized with 2-ethylhexylmethacrylate (EHMA):PMEH) was evaluated. According to the result of amperometric measurement, average density of GOD to be immobilized was optimized to 38.9 units cm(-2). Temperature and pH dependences were also investigated. Then, a flexible glucose sensor was fabricated by immobilizing GOD onto a flexible hydrogen peroxide electrode using PMEH. The flexible glucose sensor showed a linear relationship between output currents and glucose concentration in 0.05-1.00 mmol L(-1), with a correlation coefficient of 0.999. The calibration range covered the normal tear glucose level of 0.14-0.23 mmol L(-1). This indicates that the flexible biosensor is considered to be useful for monitoring of glucose in tear fluids.

关键词

柔性生物传感器葡萄糖氧化酶磷脂聚合物泪液葡萄糖电化学检测