电化学生物传感器 2010

The first isoform-selective protein biosensor: a metallothionein potentiometric electrode.

Chemical communications (Cambridge, England) Capdevila M, González-Bellavista A, Muñoz M, Atrian S, Fàbregas E
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组成图示

The first isoform-selective protein b... 传感器构成示意图

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传感器类型

电化学生物传感器

检测对象

金属硫蛋白1(metallothionein 1, MT1);样品基质:MiliQ 水标准液(制备用 50 mM Tris-HCl 缓冲液),文中未报告实际生物样品

检测原理

该传感器基于离子选择性电极原理。Zn7-MT1 复合物作为蛋白离子载体被截留在聚砜固态膜中,膜与样品水相接触后,溶液中的 MT1 与膜内 Zn7-MT1 发生特异性复合物化/界面相互作用,改变膜-溶液界面的电荷分布与相界电位。电位响应随 MT1 浓度对数变化,校准曲线斜率约 53 mV/dec。由于 MT1 与 MT4 对 Zn(II) 配位能力不同,MT4 对 Zn(II) 配位较弱,在 10^-6 M MT4 存在下对 MT1 测定影响小,从而实现亚型选择性。信号由电位计直接读出,无需孵育、标记或再生。

检测灵敏度

LOD: 1.0 × 10^-7 M;灵敏度: 53 mV/dec;校准范围: 5.0 × 10^-8–5.0 × 10^-6 M;线性范围: >10^-6 M

效应效果

电极在 5.0×10^-8–5.0×10^-6 M Zn7-MT1 范围内建立校准曲线,灵敏度 53 mV/dec,检出限 1.0×10^-7 M,原文称 MT1 浓度高于 10^-6 M 时呈线性。测定至少三次重复,保证重现性与统计准确性。固定 10^-6 M MT4 干扰下,MT1 高于 3×10^-6 M 时曲线基本重合,显示良好亚型选择性。功能 pH 范围 2.0–7.0,4 ℃ 开放气氛干燥储存并周期性使用一个月性能无明显变化。作者认为其成本低、蛋白用量少、响应快、可便携和在线分析,适合 MT1 快速检测。

传感器的构成

  • 换能器/内部接触:固态内部接触(solid internal contact),传导电位信号并连接测量电路。
  • 导电表面:导电表面(conductive surface),作为电极主体与膜接触的电子传导界面。
  • 膜基质:聚砜(polysulfone, PS)溶于 DMF,经相转化形成固态膜,承载识别元件。
  • 识别元件/离子载体:Zn7-MT1 复合物(Zn7-MT1),嵌入聚砜膜中,作为蛋白离子载体选择性响应 MT1。
  • 测量介质:MiliQ 水(MiliQ water),用于稀释 MT1 标准液并与电极接触。

中文摘要

本文报道了首个具有亚型选择性的金属硫蛋白(metallothionein, MT)电位生物传感器。作者将哺乳动物 Zn7-MT1 复合物作为离子载体嵌入聚砜(polysulfone)固态膜中,制备全固态电位电极,用于直接定量 MT1。该膜通过聚砜/DMF 溶液与稀 Zn7-MT1 水相接触发生相转化,使蛋白复合物被截留在膜内,避免有机溶剂损伤。电位测量显示电极对 MT1 具有良好灵敏度(53 mV/dec)、低检出限(1.0×10^-7 M)和可用线性范围;在 10^-6 M MT4 存在下,MT1 高于 3×10^-6 M 时测量不受干扰,表明其亚型选择性。该传感器无需孵育或再生,可干燥储存,适用于 MT1 快速检测。

英文摘要

The construction of a biosensor membrane by embedding mammalian Zn(7)-MT1 complexes as ionophores in a polysulfone matrix resulted in precise, accurate and, significantly, selective electrodes for MT1 quantification, so that the presence of other mammalian MT isoforms did not interfere in MT1 measurement.