微流控生物传感器 2010

Suspended nanoparticle crystal (S-NPC): A nanofluidics-based, electrical read-out biosensor.

Lab on a chip Lei Y, Xie F, Wang W, Wu W, Li Z
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组成图示

Suspended nanoparticle crystal (S-NPC... 传感器构成示意图

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传感器类型

微流控生物传感器

检测对象

生物素(biotin,D-biotin);样品基质:PBS缓冲液(10^-4 PBS,离子浓度10 mM)

检测原理

该传感器利用紧密堆积纳米颗粒形成的纳米通道网络作为换能单元。当通道特征尺寸与Debye长度相当或更小时,双电层重叠,离子电导对体相离子浓度不敏感,而主要取决于纳米颗粒表面电荷密度。链霉亲和素修饰的硅纳米颗粒表面带负电,生物素结合后通过静电调制降低表面有效负电荷密度,并使部分纳米通道被阻塞。在低离子强度PBS中,表面电荷变化占主导,S-NPC电导随生物素浓度增加而下降;在高离子强度下,屏蔽效应使电导变化很小。过量生物素物理吸附可使表面转为正电荷,电导出现回升。铂电极在0.1 V偏置下测量阻抗/电导变化,从而将生物素浓度转换为电学信号。

检测灵敏度

检测范围: 1 nM–10 mM(10^-4 PBS);灵敏度: 160 nS/nM;可检测浓度: 5 nM(电导变化11.8%);5 μM时电导下降76.3%

效应效果

该传感器在低离子强度PBS中对生物素响应明显:5 nM引起11.8%电导变化,5 μM时电导下降76.3%;>50 μM时过量生物素吸附使表面转正(ζ电位+11.79±1.39 mV),电导回升。高离子强度下双电层屏蔽使变化很小。文中未报告选择性、稳定性、RSD、实际样品回收率或方法对比,仅说明每点重复三次。作者强调其制备简单、成本低、速度快,电学信号大(1 mM缓冲液中约10^-4 S,单纳米通道约10^-9–10^-10 S,微通道NPC约10^-6 S),可集成微/纳流控组件,适合微全分析系统。

传感器的构成

  • 基底/换能器:硅微孔膜(suspended silicon membrane,50 μm厚,20 μm×20 μm微孔),支撑S-NPC并形成纳米通道网络
  • 封装储液池:PDMS复制品(PDMS reservoirs),可逆键合硅基底,容纳PBS缓冲液
  • 电极:铂电极(Pt electrodes),用于施加0.1 V偏置并测量阻抗
  • 纳米材料修饰层:520 nm链霉亲和素修饰硅纳米颗粒(streptavidin-modified silica nanoparticles)自组装成S-NPC,提供纳米通道与识别表面
  • 识别元件:链霉亲和素(streptavidin),修饰于硅纳米颗粒表面,特异性结合生物素
  • 信号读出:阻抗分析仪(HP4192A),测量S-NPC电导/阻抗变化

中文摘要

本文报道一种基于纳米流体电动力学原理的悬浮纳米颗粒晶体(S-NPC)电学读出生物传感器。紧密堆积的纳米颗粒在微孔中形成纳米通道网络,当通道尺寸与Debye长度相当时,离子电导主要受表面电荷密度控制。作者利用标准硅微加工制备50 μm厚硅膜上的20 μm×20 μm微孔,将单分散纳米颗粒悬浮液装入背腔,经蒸发诱导自组装形成S-NPC,并用PDMS储液池和铂电极进行阻抗测量。作为初步验证,采用520 nm链霉亲和素修饰硅纳米颗粒构建S-NPC,在PBS缓冲液中检测生物素。生物素与链霉亲和素结合后改变纳米颗粒表面电荷密度,使低离子强度下S-NPC电导发生显著变化。结果表明,该传感器在10^-4 PBS中对生物素的检测范围约为1 nM–10 mM,灵敏度为160 nS/nM,5 nM生物素即可产生11.8%电导变化。该方案制备简单、成本低、电学信号大,可集成于微全分析系统。

英文摘要

Here we report an approach utilizing a suspended nanoparticle crystal (S-NPC) as an electrical read-out biosensor based on a nanofluidic electrokinetics principle. As a preliminary demonstration, streptavidin-modified S-NPC with a particle diameter of 520 nm was used to detect biotin in a PBS buffer. The present result indicated that the detection range of biotin by this nanofluidics-based biosensor was about 1 nM-10 muM (in 10(-4)x PBS) with a sensitivity of 160 nS/nM. Being easy to get established, low-cost, and having large electrical read-out signal, the present S-NPC is believed to be a promising biosensing scheme in the micro total analysis system.