其他(视觉相变生物传感器) 2012

Biological glucose metabolism regulated peptide self-assembly as a simple visual biosensor for glucose detection.

Macromolecular rapid communications Xu XD, Lin BB, Feng J, Wang Y, Cheng SX, Zhang XZ, Zhuo RX
阅读原文 PDF DOI PubMed

组成图示

Biological glucose metabolism regulat... 传感器构成示意图

点击图片查看大图 · 依据论文自动绘制

传感器类型

其他(视觉相变生物传感器)

检测对象

葡萄糖(glucose);样品基质:去离子水/水溶液(体外模拟体系,pH 10)

检测原理

该传感器以GOx为生物识别元件,特异性氧化葡萄糖生成葡萄糖酸。葡萄糖酸使水相pH下降,质子化含Asp或Lys残基的肽分子,改变肽链间静电排斥、氢键和萘基π堆积平衡。对凝胶剂1,质子化消除Asp负电荷,促进β-sheet纳米纤维自组装,形成三维水凝胶,发生溶胶-凝胶转变;对凝胶剂2,质子化Lys残基破坏原有纤维网络,使水凝胶解体为溶液,发生凝胶-溶胶转变。葡萄糖浓度越高,葡萄糖酸生成越快,相变时间越短。最终通过肉眼观察相变状态和所需时间实现葡萄糖检测。

检测灵敏度

原文未报告LOD、线性范围、灵敏度斜率、相关系数;相变时间:0.056 mmol葡萄糖时gelator 1约40 min、gelator 2约90 min;0.167 mmol时约32 min和65 min;0.444 mmol时约15 min和30 min。

效应效果

选择性方面,果糖(葡萄糖异构体)0.167 mmol与GOx 1 mg替代葡萄糖时,24 h内凝胶剂1溶液和凝胶剂2水凝胶均未相变,表明酶促特异性。葡萄糖量增加时相变加快:0.056 mmol时gelator 1约40 min、gelator 2约90 min;0.167 mmol时约32 min和65 min;0.444 mmol时约15 min和30 min。凝胶剂1溶液态响应快于凝胶剂2凝胶态,因葡萄糖酸更易接触分子。TEM显示约30 nm纳米纤维,CD、FTIR和荧光证实β-sheet、π堆积及解体后随机卷曲。未报告RSD、实际样品回收率及与ELISA/HPLC/qPCR对比。作者认为可作简单视觉葡萄糖检测。

传感器的构成

  • 识别元件:葡萄糖氧化酶(GOx),特异性催化葡萄糖氧化并生成葡萄糖酸
  • 代谢信号分子:葡萄糖酸(gluconic acid),由GOx催化产生,触发肽分子质子化
  • 响应/换能元件:肽凝胶剂1(Nap-Phe-Phe-Asp-OH,含Asp残基),质子化后由溶液自组装成纤维水凝胶
  • 响应/换能元件:肽凝胶剂2(Nap-Phe-Phe-Lys-Lys-CONHCH3,含两个Lys残基),质子化后水凝胶网络解体为溶液
  • 自组装结构:纳米纤维网络(平均直径约30 nm),承载溶胶-凝胶/凝胶-溶胶相变
  • 读出方式:肉眼视觉相变与相变时间,无需电极或光学仪器

中文摘要

本研究在体外模拟葡萄糖氧化酶(GOx)介导的葡萄糖代谢,并将其用于调控基于肽的构筑单元自组装。作者设计并制备了两种分别含天冬氨酸(凝胶剂1)和赖氨酸(凝胶剂2)残基的肽构筑单元。将葡萄糖和GOx加入凝胶剂1的水溶液或凝胶剂2的自组装纤维水凝胶中,构建葡萄糖代谢体系后,代谢产物葡萄糖酸可触发肽分子质子化,诱导凝胶剂1发生溶胶-凝胶转变、凝胶剂2发生凝胶-溶胶转变。由于该葡萄糖代谢调控的肽自组装基于葡萄糖氧化,可通过肉眼观察相变状态和相变时间实现葡萄糖的简单视觉检测,因此可用作葡萄糖检测的视觉生物传感器。

英文摘要

A glucose oxidase (GOx)-mediated glucose metabolism was in vitro mimicked and employed to regulate the self-assembly of peptide-based building blocks. In this new stimuli-responsive self-assembly system, two peptide-based building blocks, respectively, having aspartic acid (gelator 1) and lysine (gelator 2) residues were designed and prepared. When adding glucose and GOx to the aqueous solution of gelator 1 or the self-assembled fibrillar hydrogel of gelator 2 to construct glucose metabolism system, the metabolic product (gluconic acid) can trigger the protonation of the peptide molecules and induce the phase transitions of gelators 1 (sol-gel) and 2 (gel-sol). Because this glucose metabolism regulated peptide self-assembly is built on the oxidation of glucose, it can be used as a simple visual biosensor for glucose detection.