传感器类型
其他(视觉相变生物传感器)
检测对象
葡萄糖(glucose);样品基质:去离子水/水溶液(体外模拟体系,pH 10)
检测原理
该传感器以GOx为生物识别元件,特异性氧化葡萄糖生成葡萄糖酸。葡萄糖酸使水相pH下降,质子化含Asp或Lys残基的肽分子,改变肽链间静电排斥、氢键和萘基π堆积平衡。对凝胶剂1,质子化消除Asp负电荷,促进β-sheet纳米纤维自组装,形成三维水凝胶,发生溶胶-凝胶转变;对凝胶剂2,质子化Lys残基破坏原有纤维网络,使水凝胶解体为溶液,发生凝胶-溶胶转变。葡萄糖浓度越高,葡萄糖酸生成越快,相变时间越短。最终通过肉眼观察相变状态和所需时间实现葡萄糖检测。
检测灵敏度
原文未报告LOD、线性范围、灵敏度斜率、相关系数;相变时间:0.056 mmol葡萄糖时gelator 1约40 min、gelator 2约90 min;0.167 mmol时约32 min和65 min;0.444 mmol时约15 min和30 min。
效应效果
选择性方面,果糖(葡萄糖异构体)0.167 mmol与GOx 1 mg替代葡萄糖时,24 h内凝胶剂1溶液和凝胶剂2水凝胶均未相变,表明酶促特异性。葡萄糖量增加时相变加快:0.056 mmol时gelator 1约40 min、gelator 2约90 min;0.167 mmol时约32 min和65 min;0.444 mmol时约15 min和30 min。凝胶剂1溶液态响应快于凝胶剂2凝胶态,因葡萄糖酸更易接触分子。TEM显示约30 nm纳米纤维,CD、FTIR和荧光证实β-sheet、π堆积及解体后随机卷曲。未报告RSD、实际样品回收率及与ELISA/HPLC/qPCR对比。作者认为可作简单视觉葡萄糖检测。
传感器的构成
- 识别元件:葡萄糖氧化酶(GOx),特异性催化葡萄糖氧化并生成葡萄糖酸
- 代谢信号分子:葡萄糖酸(gluconic acid),由GOx催化产生,触发肽分子质子化
- 响应/换能元件:肽凝胶剂1(Nap-Phe-Phe-Asp-OH,含Asp残基),质子化后由溶液自组装成纤维水凝胶
- 响应/换能元件:肽凝胶剂2(Nap-Phe-Phe-Lys-Lys-CONHCH3,含两个Lys残基),质子化后水凝胶网络解体为溶液
- 自组装结构:纳米纤维网络(平均直径约30 nm),承载溶胶-凝胶/凝胶-溶胶相变
- 读出方式:肉眼视觉相变与相变时间,无需电极或光学仪器
中文摘要
本研究在体外模拟葡萄糖氧化酶(GOx)介导的葡萄糖代谢,并将其用于调控基于肽的构筑单元自组装。作者设计并制备了两种分别含天冬氨酸(凝胶剂1)和赖氨酸(凝胶剂2)残基的肽构筑单元。将葡萄糖和GOx加入凝胶剂1的水溶液或凝胶剂2的自组装纤维水凝胶中,构建葡萄糖代谢体系后,代谢产物葡萄糖酸可触发肽分子质子化,诱导凝胶剂1发生溶胶-凝胶转变、凝胶剂2发生凝胶-溶胶转变。由于该葡萄糖代谢调控的肽自组装基于葡萄糖氧化,可通过肉眼观察相变状态和相变时间实现葡萄糖的简单视觉检测,因此可用作葡萄糖检测的视觉生物传感器。
英文摘要
A glucose oxidase (GOx)-mediated glucose metabolism was in vitro mimicked and employed to regulate the self-assembly of peptide-based building blocks. In this new stimuli-responsive self-assembly system, two peptide-based building blocks, respectively, having aspartic acid (gelator 1) and lysine (gelator 2) residues were designed and prepared. When adding glucose and GOx to the aqueous solution of gelator 1 or the self-assembled fibrillar hydrogel of gelator 2 to construct glucose metabolism system, the metabolic product (gluconic acid) can trigger the protonation of the peptide molecules and induce the phase transitions of gelators 1 (sol-gel) and 2 (gel-sol). Because this glucose metabolism regulated peptide self-assembly is built on the oxidation of glucose, it can be used as a simple visual biosensor for glucose detection.