电化学生物传感器 2009

Hollow spherical nanostructured polydiphenylamine for direct electrochemistry and glucose biosensor.

Biosensors & bioelectronics Santhosh P, Manesh KM, Uthayakumar S, Gopalan AI, Lee KP
阅读原文 PDF DOI PubMed

组成图示

Hollow spherical nanostructured polyd... 传感器构成示意图

点击图片查看大图 · 依据论文自动绘制

传感器类型

电化学生物传感器

检测对象

葡萄糖(Glucose);样品基质:PBS 缓冲液、血清(serum)

检测原理

葡萄糖扩散至电极表面后,被固定于中空球聚二苯胺(HS-PDPA)基质中的葡萄糖氧化酶(GOx)催化氧化,生成过氧化氢(H2O2)。HS-PDPA 纳米球具有高比表面积和良好导电性,使 GOx 的 FAD 辅基与铂电极之间形成快速直接电子转移(DET),表观电子转移速率常数约 2.25 s−1。在 +0.65 V 工作电位下,酶催化产生的 H2O2 在电极界面发生电化学氧化,产生安培电流;电流随葡萄糖浓度升高而增大,并在 1–28 mM 范围内线性。Nafion 保护层通过离子交换抑制抗坏血酸、尿酸和对乙酰氨基酚的干扰。该传感器无外源标记放大,主要依靠纳米结构高酶负载和快速电子转移提高灵敏度。

检测灵敏度

LOD: 0.05 mM (S/N = 3);线性范围: 1–28 mM;灵敏度: 1.77 μA mM−1 cm−2;R^2 = 0.9931;FIA 线性范围: 1–25 mM;R^2 = 0.9996

效应效果

该传感器在 +0.65 V 下对葡萄糖具有良好抗干扰能力,5 mM 抗坏血酸(AA)、尿酸(UA)和对乙酰氨基酚(AP)均无明显干扰。4 mM 葡萄糖安培信号在 30 min 内稳定;连续 23 d 内平均电流无显著变化,之后灵敏度下降。九支电极重现性 RSD 为 4.23%,重复测量 RSD 约 0.8%(n=9),流注入重复进样 RSD 为 0.52%(n=3)。血清样品与商用血糖仪结果线性相关,斜率 0.982,R^2=0.9913。与常规 PDPA-GOx 相比,HS-PDPA-GOx 在 25 mM 葡萄糖下电流约 40.1 μA cm−2,明显高于 1.85 μA cm−2,作者认为可用于临床实验室血糖检测。

传感器的构成

  • 工作电极基底:铂(Pt)圆盘电极,提供导电基底与电子转移动力
  • 纳米修饰层:中空球纳米结构聚二苯胺(HS-PDPA),由二苯胺(DPA)经蒙脱土(MMT)层间原位聚合和α-萘磺酸(α-NSA)软模板自组装制备,提供高比表面积、导电通道和酶固定基质
  • 交联固定剂:戊二醛(Glu),交联并固定葡萄糖氧化酶(GOx)于 HS-PDPA 膜
  • 识别元件:葡萄糖氧化酶(GOx,Aspergillus niger,EC 1.1.3.4),催化葡萄糖氧化并保留 FAD 直接电子转移
  • 抗干扰保护层:Nafion 薄膜,覆盖电极表面,利用离子交换能力抑制抗坏血酸(AA)、尿酸(UA)、对乙酰氨基酚(AP)干扰
  • 信号换能产物:过氧化氢(H2O2),由 GOx 催化葡萄糖氧化生成,在 +0.65 V 被电化学氧化产生电流

中文摘要

本文通过软模板辅助自组装方法制备了中空球纳米结构聚二苯胺(HS-PDPA),并将葡萄糖氧化酶(GOx)固定于 HS-PDPA 基质中,构建了酶型葡萄糖生物传感器。HS-PDPA–GOx 电极呈现一对清晰、可逆的氧化还原峰,表明 GOx 的 FAD 辅基与导电聚合物之间发生快速直接电子转移。在 +0.65 V 工作电位下,该电极对葡萄糖具有高灵敏度(1.77 μA mM−1 cm−2)、良好稳定性和重现性。安培电流响应在 1–28 mM 葡萄糖范围内呈线性,检出限为 0.05 mM(S/N=3)。在抗坏血酸、尿酸和对乙酰氨基酚最大生理浓度存在下,电极仍对葡萄糖保持高选择性,可用于临床血糖监测。

英文摘要

Nanostructured, hollow spheres of polydiphenylamine (HS-PDPA) are prepared through a "soft template assisted self-assembly" approach. An enzymatic glucose biosensor is fabricated through immobilizing glucose oxidase (GOx) into HS-PDPA matrix. The HS-PDPA-GOx electrode exhibits a pair of well-defined reversible redox peaks with a fast heterogeneous electron transfer rate. At an applied potential of +0.65V, HS-PDPA-GOx electrode possesses high sensitivity (1.77 microAmM(-1)cm(-2)), stability and reproducibility towards glucose. The amperometric current response of HS-PDPA-GOx to glucose is linear in the concentration range between 1 and 28 mM with a detection limit of 0.05 mM (S/N=3). Also, HS-PDPA-GOx electrode shows high selectivity towards glucose in the presence of ascorbic acid, uric acid and acetaminophen at their maximum physiological concentrations.

关键词

中空球聚二苯胺葡萄糖氧化酶电化学生物传感器葡萄糖检测直接电子转移