Engineering protein and DNA tools for creating DNA-dependent protein switches.
可开关蛋白能响应配体结合、pH、温度或光等输入，在失活（OFF）与激活（ON）构象间转换。CRISPR系统中的Cas核酸酶是典型例子，其活性由特定DNA或RNA序列结合调控。虽然Cas酶中寡核苷酸结合调控生物活性的机制复杂且高度特异，但蛋白工程与DNA工程的进展使这种控制模式可引入其他酶。本章重点介绍结合这两类工程手段构建生物传感器...
Construction of Allosteric Protein Switches by Alternate Frame Folding and Intermolecular Fragment Exchange.
交替框架折叠（AFF）和蛋白/片段交换（FREX）是用于在无固有变构性质的蛋白中工程化变构构象变化的相关技术。其主要目的之一是将普通结合蛋白转化为生物分子开关，使输入事件转化为光学或功能读出。本章提供将任意结合蛋白改造为具有FRET输出的荧光生物传感器的指南。由于AFF和FREX机制基于蛋白结构与稳定性的普遍原理，而非目标蛋白特有属...