Dysregulated NAD(H) homeostasis associated with ciprofloxacin tolerance in
抗生素持久性（亚群耐受）指抗生素敏感菌中部分细胞在杀菌浓度抗生素长期暴露后存活，并在抗生素去除后可再生长，可导致疗程延长、感染复发和遗传耐药加速。目前尚无能在抗生素暴露前将耐受细胞从总体中分离的生物标志物。已有研究表明持久者常存在胞内氧化还原稳态紊乱，因此本研究采用 Peredox [NADH:NAD+] 荧光生物传感器，在单细胞水...
Simultaneous Monitoring of the Adenosine Triphosphate Levels in the Cytoplasm and Nucleus of a Single Cell with a Single Nanowire-Based Fluorescent Biosensor.
同步监测单细胞不同位点的三磷酸腺苷（ATP）水平，对揭示 ATP 相关细胞过程与疾病机制至关重要。本文设计并制备了一种基于单硅纳米线的荧光生物传感器，用于以高空间分辨率同时监测单个细胞胞质与细胞核中的 ATP 水平。该传感器以硅纳米线（SiNWs）为一维基底，表面包覆含荧光素异硫氰酸酯（FITC）的二氧化硅层，并通过羧基硅氧烷试剂接...
A yeast FRET biosensor enlightens cAMP signaling.
出芽酵母中的 cAMP-PKA 信号级联调控细胞对变化环境的适应。作者开发了 yEPAC，一种基于 FRET 的酵母 cAMP 生物传感器，并结合同步流式细胞术，在突然营养转换过程中对单细胞水平的动态 cAMP 变化进行高通量定量。研究发现，特征性 cAMP 峰能够区分不同碳源转换，并在单细胞间较为均一，尤其向葡萄糖转换时最为明显。...
An Improved ATP FRET Sensor For Yeast Shows Heterogeneity During Nutrient Transitions.
三磷酸腺苷（ATP）是代谢中主要的自由能载体。在酿酒酵母中，转入富葡萄糖条件会引起 ATP 水平的动态变化，但单细胞层面这些动态的异质性尚不清楚；同时胞内 pH 也会变化，并影响基于荧光的单细胞生物传感器读数。为可靠测量单个酵母细胞中的 ATP 变化，作者开发了 yAT1.03，即 AT1.03 ATP 生物传感器的改进版本，使其对...
Measuring glycolytic flux in single yeast cells with an orthogonal synthetic biosensor.
细胞群体中个体细胞间的代谢异质性给基础与应用研究带来挑战。识别代谢异质性并研究其产生机制，需要能够深入单个细胞代谢的工具。虽然已有方法可测量单细胞代谢物水平，但尚缺乏在单细胞水平测量代谢通量——即代谢活动最终功能输出——的能力。本研究结合启动子工程、计算蛋白设计、生化方法、蛋白质组学和代谢组学，开发了一种用于测量单细胞酵母糖酵解通量...