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Promoter engineering strategies for the overproduction of valuable metabolites in microbes.

Applied microbiology and biotechnology 2019

启动子工程是代谢工程与合成生物学中的关键技术,也是调控遗传电路和多基因生物合成通路的核心元件。本文综述了微生物启动子工程的最新进展。首先讨论了内源启动子在微生物中过表达关键酶、提高目标代谢物产量中的应用;随后介绍了通过定点突变研究核苷酸交换对启动子强度影响的方法,包括易错PCR和饱和突变等策略。文章进一步阐述了围绕核心启动子区和上游...

Screening of an Escherichia coli promoter library for a phenylalanine biosensor.

Applied microbiology and biotechnology 2016 Mahr R, von Boeselager RF, Wiechert J, Frunzke J

近年来,基于转录因子的生物传感器为工程菌生产菌株的构建提供了新机遇,但合成调控回路的设计依赖于选择合适的转录因子—启动子对,将效应物分子浓度转换为可测量输出。本文提出一种高效筛选启动子库的策略,用于生物传感器设计。作者将包含约2000个不同大肠杆菌启动子—GFPmut2融合的大肠杆菌Alon库菌株混合,通过荧光激活细胞分选(FACS...