Reconstructing Signaling Networks Using Biosensor Barcoding.
理解信号网络如何调控对阐明细胞和生物体响应内外刺激及开发疾病治疗策略至关重要。为此,需要在扰动条件下测量网络中各节点的活性。本文介绍一种生物传感器条形码技术,利用遗传编码荧光生物传感器在活细胞中大规模多路复用追踪多种信号活性。该方法将表达不同生物传感器的细胞用由蓝色或红色荧光蛋白组成的条形码标记,这些条形码蛋白被定位到不同亚细胞位置...
理解信号网络如何调控对阐明细胞和生物体响应内外刺激及开发疾病治疗策略至关重要。为此,需要在扰动条件下测量网络中各节点的活性。本文介绍一种生物传感器条形码技术,利用遗传编码荧光生物传感器在活细胞中大规模多路复用追踪多种信号活性。该方法将表达不同生物传感器的细胞用由蓝色或红色荧光蛋白组成的条形码标记,这些条形码蛋白被定位到不同亚细胞位置...
在同一个活细胞中同时成像两种或多种荧光生物传感器,可揭示蛋白质活性在时空上的协调关系。然而,同时使用多个 Förster 共振能量转移(FRET)生物传感器存在毒性较高且需要光谱正交荧光团等困难。本研究构建了一种可特异性结合三种不同蛋白激活构象的生物传感器组分,从而用更少荧光团实现多路复用 FRET 并降低毒性。作者通过组合下游效应...
遗传编码荧光生物传感器可实时监测活细胞内的生化活动,但其多路复用能力受荧光蛋白发射光谱重叠和可用光谱空间限制。本文开发了一套遗传条形码蛋白,利用不同颜色荧光蛋白与不同亚细胞定位的组合,可生成超过100个条形码,并与常用生物传感器光谱可分离。将表达不同荧光生物传感器的条形码细胞混合后,通过共聚焦光谱成像同时采集条形码与生物传感器信号,...
多模干涉(MMI)波导可用于产生波长依赖的斑点图案,使单个光流片能够同时检测多种分析物,适用于疾病诊断。光流片系统需要在尽可能少荧光标记分子下检测DNA、蛋白质或病毒,并支持多目标同时检测。此类多斑点图案的保真度对高灵敏度和准确目标识别非常重要。为提高环境稳定性,本文在SiO2基波导中引入埋入肋结构。通过实验与仿真,本文探索了基于反...
基因编码荧光生物传感器使活细胞内信号转导活动的实时追踪成为可能,但传统单色传感器易受探针浓度和成像条件影响,而双通道FRET比率传感器又限制多路复用。为此,作者开发了基于同色FRET(homo-FRET)的新型荧光生物传感器FLAREs,将单色传感器的通道优势与定量比率读出相结合。FLAREs由两个同色荧光蛋白夹持一个分子开关构成,...
本文报道了一种单片集成阵列波导光栅(AWG)微光谱仪—微流控平台,可用于荧光光谱分析。该概念验证型微光谱仪尺寸仅为 1 cm×1 cm,具有 8 个中心波长不同的输出通道。作者表明,通过相机芯片检测各输出通道信号,可重建被测物的完整荧光光谱。通过对混合量子点溶液、有机荧光染料 Cy5 以及碘化丙啶(PI)—DNA 检测体系进行荧光测...