5 条结果 关键词:无细胞蛋白合成 ×

Characterizing a New Fluorescent Protein for a Low Limit of Detection Sensing in the Cell-Free System.

ACS synthetic biology 2022 Copeland CE, Kim J, Copeland PL, Heitmeier CJ 等 5 人

基于无细胞蛋白合成(CFPS)的生物传感器具有高精度、低成本优势,但生物标志物在多种生物样本中常处于低浓度,因此需扩大动态范围并降低检出限,同时避免高背景。以往提高动态范围多依赖放大分析物输入信号,可能引入假阳性。本研究旨在提高 CFPS 系统的蛋白合成能力和报告蛋白输出信号,以实现更低 LOD。作者引入新型荧光蛋白 mNeonGr...

Self-assembled nanoparticle-enzyme aggregates enhance functional protein production in pure transcription-translation systems.

PloS one 2022 Thakur M, Breger JC, Susumu K, Oh E 等 8 人

无细胞蛋白合成系统(CFPS)利用细胞转录-翻译(TX-TL)机器在体外合成蛋白,可用于难表达蛋白生产、遗传电路筛选和生物传感器开发,但存在反应速率受扩散限制、商业试剂成本高和长期稳定性差等问题。为改善这些局限,作者开展概念验证实验,利用纳米颗粒驱动其组成蛋白的纳米聚集来增强 CFPS 产量。他们将商用 PURExpress 纯化 ...

Quantitative Analysis of γ-Aminobutyric Acid by Combined Cell-Free Protein Synthesis and Transamination Reactions.

ACS synthetic biology 2022 Lee YJ, Lim HJ, Kim DM

细胞的合成能力不仅可用于生产生物分子,也可用于分析物检测。无细胞蛋白合成(CFPS)可作为生物检测中的信号放大模块,避免全细胞微生物传感器带来的许多问题。本文开发了一种结合 γ-氨基丁酸(GABA)酶促转化与氨基酸依赖型 CFPS 的 GABA 定量方法。样品中的 GABA 在转氨酶作用下将氨基转移至丙酮酸,生成丙氨酸;生成的丙氨酸...

Key reaction components affect the kinetics and performance robustness of cell-free protein synthesis reactions.

Computational and structural biotechnology journal 2022 Banks AM, Whitfield CJ, Brown SR, Fulton DA 等 10 人

无细胞蛋白合成(CFPS)反应因可用于基因构建体原型验证、生物传感器技术和具有新化学性质蛋白的生产而受到关注。已有工作多集中于优化CFPS流程,以提高蛋白产量、降低成本或简化生产流程。本文对一种常用CFPS反应缓冲液中的20种组分进行统计实验设计(DoE)分析,同时识别影响蛋白产量、反应速率、滞后时间和反应持续时间的因素及因素间交互...

Towards detection of SARS-CoV-2 RNA in human saliva: A paper-based cell-free toehold switch biosensor with a visual bioluminescent output.

New biotechnology 2022 Hunt JP, Zhao EL, Free TJ, Soltani M 等 10 人

新冠疫情凸显了对快速、低成本、可广泛分发且可在现场使用的核酸检测技术的迫切需求。传统核酸检测通常需要专业人员、复杂实验室、昂贵设备和较长处理时间。本研究采用冻干无细胞蛋白合成(CFPS)和toehold switch核糖调控器,开发了一种仅需加入唾液即可激活的纸基核酸检测平台。首先筛选出经济且供应稳定的纸基载体,并设计了可批量生产、...