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Development of a Cell-Free Optical Biosensor for Detection of a Broad Range of Mercury Contaminants in Water: A Plasmid DNA-Based Approach.

ACS omega 2019 Gupta S, Sarkar S, Katranidis A, Bhattacharya J

汞是全球主要水污染物之一。本研究基于携带 merR 基因的遗传修饰质粒,分别构建了以荧光素酶(LucFF)和翡翠绿色荧光蛋白(EmGFP)为报告基因的全细胞与无细胞生物传感器,用于检测水样中的汞。两种构建体在大肠杆菌和无细胞体系中均达到 1 ppb 汞的检出限。研究发现,高浓度汞对细菌具有细胞毒性,导致全细胞传感器在高汞浓度下出现异...

Optimizing Cell-Free Biosensors to Monitor Enzymatic Production.

ACS synthetic biology 2019 Pandi A, Grigoras I, Borkowski O, Faulon JL

无细胞系统是代谢工程和合成生物学中快速、高通量原型化生物部件的有前景平台。其主要限制之一是转录阻遏蛋白的抑制倍数较低,因此主要依赖阻遏蛋白的原核生物传感器开发受到限制。本研究展示如何在无细胞系统中优化此类生物传感器,包括采用含转录因子(TF)质粒的细胞制备 TF 掺杂裂解液、在加入报告 DNA 前对 TF 质粒进行预孵育,以及通过补...