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Live Cell Imaging Using Riboswitch-Spinach tRNA Fusions as Metabolite-Sensing Fluorescent Biosensors.

Methods in molecular biology (Clifton, N.J.) 2015 Kellenberger CA, Hallberg ZF, Hammond MC

开发荧光生物传感器的主要动机是实时监测细胞内代谢物水平。大多数可遗传编码的荧光传感器基于受体蛋白与荧光蛋白结构域的融合,但许多小分子代谢物缺乏已知蛋白受体,且基于蛋白受体的FRET传感器工程化困难。近年来,小分子结合核糖开关通过与体外筛选的Spinach适配体融合,被改造为荧光生物传感器;Spinach可结合前荧光、细胞可渗透的GF...

RNA-Based Fluorescent Biosensors for Live Cell Imaging of Second Messenger Cyclic di-AMP.

Journal of the American Chemical Society 2015 Kellenberger CA, Chen C, Whiteley AT, Portnoy DA 等 5 人

环二腺苷酸(cdiA)是一种预测广泛存在于革兰氏阳性菌、部分革兰氏阴性菌和古菌中的第二信使。在人类病原体单核细胞增生李斯特菌中,cdiA 是调控代谢功能和细胞壁稳态的关键分子,其水平降低会增加抗生素敏感性。作者通过将 Spinach2 适配体与 cdiA 核糖开关的配体结合域融合,构建了 cdiA 荧光生物传感器。该传感器用于在活的...

GEMM-I riboswitches from Geobacter sense the bacterial second messenger cyclic AMP-GMP.

Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 2015 Kellenberger CA, Wilson SC, Hickey SF, Gonzalez TL 等 11 人

环状二核苷酸是一类调控细菌生理过程的重要第二信使。环状 AMP-GMP(cAG,又称 3′-5′ cGAMP)的合成酶 DncV 与霍乱弧菌高感染性相关,但其在多数细菌中的分布和功能仍不清楚。本文发现环境细菌硫酸盐还原地杆菌(Geobacter sulfurreducens)可产生 cAG,并利用 GEMM-I 类核糖开关中的一个亚...

In vitro analysis of riboswitch-Spinach aptamer fusions as metabolite-sensing fluorescent biosensors.

Methods in enzymology 2015 Kellenberger CA, Hammond MC

荧光生物传感器的发展旨在实时监测活细胞中特定代谢物水平。常见策略包括将蛋白受体与荧光蛋白融合,或合成小分子反应探针;天然代谢物感应核糖开关也曾用于报告基因系统。近期研究表明,将核糖开关适配体与体外筛选的 Spinach 适配体融合,可构建 RNA 荧光生物传感器,其中 Spinach 结合细胞可渗透的条件荧光分子 DFHBI。本文描...