Antioxidants (Basel, Switzerland)
2022
de Haan LR, Reiniers MJ, Reeskamp LF, Belkouz A 等 9 人
氧化应激与多种疾病的发生发展密切相关。电子传递链(ETC)抑制剂如鱼藤酮(rotenone)和抗霉素A(antimycin A)常被用于体外模型以诱导线粒体氧化应激。2′,7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH2-DA)是一种荧光探针:非荧光的DCFH2-DA可穿过细胞膜,经酯酶去乙酰化为DCFH2,再被细胞内活性氧(ROS)氧化为...
Bio-protocol
2022
Gast V, Siewers V, Molin M
过氧化氢(H2O2)是多种生物过程的毒性氧化副产物,胞内水平过高会引发氧化应激,促使细胞启动保护性应答。传统活性氧荧光染料在特异性和时空分辨率上存在局限,而遗传编码荧光指示剂(GEFI)能够特异性检测低水平胞内 H2O2。本方案介绍一种高灵敏度 GEFI roGFP2-Prx1 在酿酒酵母 Saccharomyces cerevis...
Redox biology
2022
Zenin V, Ivanova J, Pugovkina N, Shatrova A 等 14 人
遗传编码氧化还原活性化合物生物传感器的发展推动了细胞内氧化还原活性研究新方法。此前作者利用遗传编码生物传感器 HyPer 定量测量活细胞内过氧化氢(H2O2)浓度。本研究改进该方法,用于比较不同表型人细胞在 H2O2 诱导外源氧化应激下胞外与胞质 H2O2 浓度梯度,从而评估抗氧化系统强度。实验使用稳定表达胞质 HyPer 的癌细胞...
Nature communications
2022
Kostyuk AI, Tossounian MA, Panova AS, Thauvin M 等 16 人
缺乏实时监测活细胞和组织中(伪)次卤酸动态的工具,限制了对炎症过程的理解。本文报道一种基因编码荧光生物传感器 Hypocrates,用于可视化(伪)次卤酸及其衍生物。Hypocrates 由环状置换黄色荧光蛋白(cpYFP)整合到大肠杆菌转录阻遏蛋白 NemR 的修饰结构中组成。作者证明 Hypocrates 具有比率型、可逆响应,...