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Real-time monitoring of the in vivo redox state transition using the ratiometric redox state sensor protein FROG/B.

Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 2020 Sugiura K, Mihara S, Fu N, Hisabori T

细胞内氧化还原状态是调控多种生理过程的关键因素,实时监测该状态对理解细胞稳态具有重要意义。已有多种荧光传感器蛋白用于监测细胞内氧化还原变化,但作者此前开发的 Oba-Q 和 Re-Q 分别在氧化和还原条件下发生荧光淬灭,其发射强度直接受原位表达水平影响,难以定量。为克服这一局限,本研究设计了一种具有单一激发峰和双可变发射峰的氧化还原...

Multicolor redox sensor proteins can visualize redox changes in various compartments of the living cell.

Biochimica et biophysica acta. General subjects 2019 Sugiura K, Tanaka H, Kurisu G, Wakabayashi KI 等 5 人

细胞内氧化还原状态的变化是多种代谢反应的结果,并同步调控细胞生理过程,因此监测活细胞氧化还原状态对理解细胞生理至关重要。目前已开发多种基因编码荧光氧化还原传感器。此前作者开发了氧化敏感荧光蛋白 Oba-Q,其在氧化条件下发生显著荧光猝灭。为扩展氧化还原传感器蛋白的应用范围,本研究基于 Oba-Q 的分子架构进行优化,成功制备了基于 ...

Crystal Structure of Green Fluorescent Protein Clover and Design of Clover-Based Redox Sensors.

Structure (London, England : 1993) 2018 Campbell BC, Petsko GA, Liu CF

作者测定了最亮绿色荧光蛋白之一 Clover 的晶体结构,发现相对野生型 GFP 的 T203H/S65G 突变将关键残基 E222 锁定为类似 EGFP 主要构象的固定构型,使色原体平衡偏向去质子化阴离子态,从而提高消光系数、抑制光激活并导致光谱红移。H203 与色原体之间的 π-π 堆积进一步改善色原体堆积并限制非辐射衰减,贡献...

Redox sensor proteins for highly sensitive direct imaging of intracellular redox state.

Biochemical and biophysical research communications 2015 Sugiura K, Nagai T, Nakano M, Ichinose H 等 7 人

细胞内氧化还原状态是调控代谢酶活性、活性氧生成与清除等基本细胞功能的关键因素。遗传编码荧光氧化还原传感器(如 roGFP 和 Redoxfluor)已用于活细胞氧化还原状态研究,但在含有其他有色色素的细胞中应用受限。为此,作者开发了更简单的氧化敏感荧光蛋白 Oba-Q(oxidation balance sensed quenchi...