PLoS biology
2018
Mendelsohn BA, Bennett NK, Darch MA, Yu K 等 13 人
能量代谢不足或失调可能参与多种遗传性、退行性疾病、癌症甚至衰老。ATP 是细胞中央能量载体,但调控 ATP 水平的关键通路尚未系统阐明。作者将富集线粒体基因的池化 CRISPRi 文库、荧光生物传感器和流式细胞分选(FACS)结合,建立高通量遗传筛选,用于检测活人细胞中 ATP 浓度。该策略鉴定出此前未知参与能量代谢的基因。多数线粒...
ACS synthetic biology
2018
Yoo JI, O'Malley MA
膜蛋白在生物技术中具有重要价值,但高产量功能性膜蛋白的制备困难限制了其在合成生物学中的应用。例如,G蛋白偶联受体(GPCR)用于全细胞生物传感器时,受限于其在所选宿主细胞表面功能性表达,可检测分子范围有限。本文提出一种简便方法,仅通过改变表达载体即可显著提高酿酒酵母中功能性膜蛋白的产量与均一性。以人腺苷A2a受体为模型,使用常用着丝...
Applied microbiology and biotechnology
2018
Zhang X, Zhang X, Xu G, Zhang X 等 6 人
L-丝氨酸广泛用于医药、食品和化妆品工业。虽然谷氨酸棒杆菌可从糖直接发酵生产 L-丝氨酸,但产量仍较低。本研究以工程菌 C. glutamicum ΔSSAAI 为出发菌株,采用大气压室温等离子体(ARTP)诱变提高 L-丝氨酸产量,并基于特异性响应 L-丝氨酸的转录因子 NCgl0581 构建新型荧光生物传感器,通过荧光激活细胞分...
Applied biochemistry and biotechnology
2018
Ravikumar S, David Y, Park SJ, Choi JI
本研究构建了可用于高通量筛选谷氨酸产生微生物的氨基酸生物传感器。该传感器基于双组分调控系统(TCRS)与绿色荧光蛋白(GFP)报告系统。作者将来自 Planococcus sp. PAMC21323 的传感器组氨酸激酶 DegS 的 N 端结构域与大肠杆菌渗透压传感器 EnvZ 的催化结构域融合,构建嵌合 DegS/EnvZ(Deg...