Metabolic engineering communications
2020
Sonntag CK, Flachbart LK, Maass C, Vogt M 等 5 人
近年来,转录生物传感器已成为代谢工程中的有力工具,可在单细胞水平对胞内代谢物进行半定量检测。然而,其应用常受限于各传感器组件的固有特性及其相互作用;在异源宿主中,传感器还常因低胞内代谢物浓度下信号饱和而失效,从而限制其在高水平生产菌株和后期工程阶段的使用。本文提出一种统一的生物传感器设计,可微调关键传感器参数,并在异源表达宿主中恢复...
Nature communications
2020
Bennett NK, Nguyen MK, Darch MA, Nakaoka HJ 等 13 人
能量代谢紊乱是细胞功能障碍和多种疾病的重要驱动因素,但增加或维持细胞内三磷酸腺苷(ATP)水平的方法仍缺乏。为绘制调控细胞ATP的基因与通路全景图谱——ATPome,作者将全基因组CRISPR干扰/激活筛选与ATP生物传感器相结合,在呼吸、糖酵解和基础三种代谢条件下系统鉴定ATP调控基因。结果显示,ATP水平可通过促进能量生成或抑制...
ACS omega
2020
Han G, Xu N, Sun X, Chen J 等 6 人
L-缬氨酸是支链氨基酸,也是多数哺乳动物必需营养素。本研究首先构建了 L-缬氨酸生产菌谷氨酸棒杆菌 C. glutamicum ΔppcΔaceEΔalatΔpqo。在此基础上,作者构建了基于 Lrp 型转录调控因子和温度敏感复制子的改进生物传感器,用于将胞内 L-缬氨酸浓度转换为可筛选的荧光输出。随后,利用大气常温等离子体(ART...
Metabolic engineering
2020
假单胞菌 Pseudomonas putida KT2440 因可将多种碳源转化为顺,顺-粘康酸等产物而受到关注。此前工程菌株可从葡萄糖生产粘康酸,但周质葡萄糖氧化导致大量 2-酮葡萄糖酸积累,降低产物收率与选择性。删除葡萄糖脱氢酶基因 gcd 可避免 2-酮葡萄糖酸积累,却显著减慢生长和粘康酸生产。本研究采用适应性实验室进化改善不...