Resolving subcellular pH with a quantitative fluorescent lifetime biosensor.
亚细胞pH变化在代谢、膜运输及治疗载体释放中起关键作用。现有pH测量多依赖pH敏感荧光团的强度变化,但强度法受传感器浓度、信噪比下降和需要参考荧光团等限制,推断pH不确定度高。本文提出将pH依赖荧光寿命成像显微镜(pHLIM)与深度学习结合,用于在单个囊泡水平准确定量活细胞亚细胞pH。作者将pH敏感荧光蛋白mApple分别融合至细胞...
亚细胞pH变化在代谢、膜运输及治疗载体释放中起关键作用。现有pH测量多依赖pH敏感荧光团的强度变化,但强度法受传感器浓度、信噪比下降和需要参考荧光团等限制,推断pH不确定度高。本文提出将pH依赖荧光寿命成像显微镜(pHLIM)与深度学习结合,用于在单个囊泡水平准确定量活细胞亚细胞pH。作者将pH敏感荧光蛋白mApple分别融合至细胞...
维生素B6衍生物(VB6Ds)对生物体生理过程至关重要,但过量摄入可引发神经损伤等健康问题;由于不同VB6Ds化学结构高度相似,其定性与定量分析具有挑战,且深度学习模型在荧光传感任务间的迁移应用仍不足。为此,作者基于金纳米团簇(AuNCs)三维荧光光谱的内在指纹,构建了两种深度学习模型,用于识别五种VB6Ds。半胱胺/N-乙酰-L-...
遗传编码荧光生物传感器可实时监测活细胞内的生化活动,但其多路复用能力受荧光蛋白发射光谱重叠和可用光谱空间限制。本文开发了一套遗传条形码蛋白,利用不同颜色荧光蛋白与不同亚细胞定位的组合,可生成超过100个条形码,并与常用生物传感器光谱可分离。将表达不同荧光生物传感器的条形码细胞混合后,通过共聚焦光谱成像同时采集条形码与生物传感器信号,...