Fluorescent protein biosensor for probing CDK/cyclin activity in vitro and in living cells.

Chembiochem : a European journal of chemical biology 2014 Van TN, Pellerano M, Lykaso S, Morris MC

细胞周期蛋白依赖性激酶（CDKs）在细胞周期进程和转录调控中起关键作用，其过度激活与癌症相关。然而，在生理背景下连续、敏感地测量其活性或药物抑制的方法有限。为此，作者设计了一种模块化荧光蛋白生物传感器CDKACT，通过CDK/周期蛋白磷酸化引起荧光强度实时变化来报告激酶活性。该传感器由组蛋白H1来源的CDK底物肽序列（引入唯一半胱氨...

荧光生物传感器 CDK/周期蛋白激酶活性活细胞成像磷酸化

Optimization of a genetically encoded biosensor for cyclin B1-cyclin dependent kinase 1.

Molecular bioSystems 2014 Belal AS, Sell BR, Hoi H, Davidson MW 等 5 人

基于荧光蛋白（FP）的生物传感器可实时监测活细胞内酶活性，但第一代 FRET 型激酶传感器通常荧光响应较低，优化过程费时费力。本文报道利用高通量大肠杆菌菌落筛选策略优化激酶 FRET 生物传感器。作者构建 pUADE 双表达质粒，在 Ptac 启动子下表达传感器变体，在 PBAD 启动子下表达组成型激酶；通过 L-阿拉伯糖诱导激酶表...

荧光生物传感器 FRET生物传感器cyclin B1-CDK1激酶活性荧光蛋白