哺乳动物细胞内天冬氨酸（aspartate, Asp）水平会随代谢状态改变并影响细胞功能，因此需要稳健、动态的 Asp 丰度检测工具。传统质谱法虽准确，但通量低、成本高且为静态终点测量。本文开发了一种基于绿色荧光蛋白（GFP）的 Asp 传感器 jAspSnFR3，其荧光强度与 Asp 浓度相关。作为纯化蛋白，jAspSnFR3 在...
无机磷酸盐（Pi）在代谢、细胞信号和能量转换中具有核心作用，动物体内 Pi 的分配必须与膳食供给及不同细胞代谢需求紧密协调。为全面理解 Pi 转运与回收机制，需要具有空间和时间分辨率的 Pi 动态监测方法。本文展示了一种遗传编码的 FRET 型 Pi 传感器在秀丽隐杆线虫中的应用。该传感器在不同细胞和组织中表达，包括头部神经元、尾部...
氧气和葡萄糖是哺乳动物细胞功能的重要营养物。本研究以C2C12小鼠肌母细胞为模型，在不同葡萄糖浓度（低糖0.6 mM、中糖5.6 mM、高糖23.3 mM）和常氧或低氧（1% O2）条件下培养，检测细胞氧消耗、葡萄糖消耗、乳酸生成及代谢状态，重点考察细胞是否出现氧顺应（oxygen conformance, OC）。短期氧消耗采用新...