Biosensor Guided Polyketide Synthases Engineering for Optimization of Domain Exchange Boundaries.

Nature communications 2023 Englund E, Schmidt M, Nava AA, Klass S 等 9 人

I型模块化聚酮合酶（PKS）是像装配线一样工作的多结构域酶。过去三十年，人们尝试替换、删除和插入新功能结构域以产生新分子。然而，插入异源结构域常使 PKS 不稳定，导致活性丧失和蛋白错误折叠。为解决该挑战，本文开发了一种基于荧光的溶解度生物传感器，可快速识别结构破坏最小的工程 PKS 变体。利用该传感器，筛选了酰基转移酶（AT）交换...

荧光生物传感器 聚酮合酶蛋白溶解度错误折叠高通量筛选

Mapping enzyme catalysis with metabolic biosensing.

Nature communications 2021 Xu L, Chang KC, Payne EM, Modavi C 等 11 人

酶工程的核心瓶颈在于高通量检测酶产物形成。本文提出一种通用且可扩展的代谢生物传感策略，将宿主细胞自身的代谢网络作为生物传感器，用于推断嵌入其中的酶是否产生目标产物。由于不同产物在合成过程中消耗不同的中心代谢物，酶活性的差异会以独特方式扰动宿主代谢组，并可通过质谱进行测量。作者将该策略与打印液滴微流控和 MALDI-MS 成像结合，对...

全细胞生物传感器 代谢生物传感微流控MALDI-MS酶工程