A general strategy to red-shift green fluorescent protein-based biosensors.
与绿色荧光蛋白（GFP）生物传感器相比，红色荧光蛋白（RFP）生物传感器因光毒性更低、自发荧光更少、组织穿透更深而具有内在优势。然而，现有RFP生物传感器常存在动态范围小、亚细胞定位错误和非期望光转换等缺陷，且可用选择有限，逐一开发耗时费力。本文提出一种通用且便捷的方法：通过遗传密码扩展，将非天然氨基酸3-氨基酪氨酸（aY）引入GF...
PIE-FLIM Measurements of Two Different FRET-Based Biosensor Activities in the Same Living Cells.
本文报道利用脉冲交错激发荧光寿命成像显微镜（PIE-FLIM）在单个活细胞中同时测量两种不同基因编码生物传感器探针的活性。许多基因编码生物传感器依赖 Förster 共振能量转移（FRET）来检测目标细胞信号事件引起的构象变化，而通过荧光寿命成像（FLIM）测量供体荧光团寿命变化是量化 FRET 的稳健方法。由于复杂信号网络研究要求...
Overexpression of native IF1 downregulates glucose-stimulated insulin secretion by pancreatic INS-1E cells.
我们此前报道，siRNA 瞬时敲低 ATP 合酶抑制因子 1（IF1）可提高模型胰腺 β 细胞 INS-1E 的 ATP 水平并增强胰岛素分泌。本研究考察长期过表达天然 IF1 对胰腺 β 细胞生物能量代谢和胰岛素分泌的影响。我们构建了稳定过表达天然 IF1 的 INS-1E 细胞系，发现 IF1 过表达导致 ATP 水平显著下降，...