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On-chip membrane protein cell-free expression enables development of a direct binding assay: A curious case of potassium channel KcsA-Kv1.3.

Analytical biochemistry 2018 Vaish A, Guo S, Murray RM, Grandsard PJ 等 5 人

整合膜蛋白在药物发现中至关重要,但其表达、纯化和体外稳定仍极具挑战。无细胞转录-翻译系统为复杂蛋白生产提供了替代方案,却因翻译后折叠不当而难以用于整合膜蛋白。本文以嵌合钾通道 KcsA-Kv1.3(K-K)为模型,研究影响无细胞表达膜蛋白体外折叠的关键因素,包括脂质和去垢剂等人工双分子层环境。研究发现,将超折叠绿色荧光蛋白(sfGF...

表面等离子共振(SPR)生物传感器 无细胞表达膜蛋白钾通道直接结合检测

Membrane protein-based biosensors.

Journal of the Royal Society, Interface 2018 Misawa N, Osaki T, Takeuchi S

膜蛋白是生物膜的核心功能组分,在嗅觉、味觉等环境刺激识别中起关键作用,其对目标分子的高特异性显著优于传统人工传感器。本综述系统介绍利用膜蛋白功能构建生物传感器的最新进展,并将现有体系分为脂质双分子层平台和细胞平台。在脂质双分子层平台中,膜蛋白被嵌入磷脂双分子层,作为生物分子与传感器件之间的桥梁;其中生物纳米孔被广泛用作传感元件,通过...

Lipidic liquid crystalline cubic phases for preparation of ATP-hydrolysing enzyme electrodes.

Biosensors & bioelectronics 2018 Zatloukalová M, Nazaruk E, Novák D, Vacek J 等 5 人

脂质液晶立方相(LCP)是模拟膜材料,可用于稳定膜蛋白并进行结构分析。本研究将膜ATP水解酶Na+/K+-ATPase(NKA)包埋到单油酸甘油酯(MO)基LCP中,采用小角X射线散射(SAXS)表征,所有配方均呈Pn3m对称。将NKA-LCP材料固定于玻璃碳电极表面,形成高稳定性酶电极和新传感平台。通过酪氨酸和色氨酸残基的阳极氧化...