Frontiers in microbiology
2018
Pothier MP, Hinz AJ, Poulain AJ
砷毒性高且分布广泛,但分散式供水(如家用井水)中的砷浓度常未被量化,现有砷形态分析技术成本高且便携性差。本文报道一种基于大肠杆菌 ArsR 的全细胞荧光生物传感器检测法,可在环境相关浓度下定量无机砷并评估其生物可利用形态。研究发现,常见于生物检测暴露介质中的无机磷酸盐会限制 As(V) 摄取,可能解释既往 As(V) 检测结果的差异...
ACS synthetic biology
2018
Kim SK, Kim SH, Subhadra B, Woo SG 等 9 人
异戊二烯是合成橡胶前体和萜类途径特征产物。本研究利用 Ralstonia pickettii 的 TbuT 转录调控因子构建异戊二烯生物传感器,使其在工程大肠杆菌中响应细胞内异戊二烯并驱动荧光报告基因表达。由于 TbuT 将异戊二烯识别为次优效应分子,作者采用 T7 RNA 聚合酶介导的转录级联放大报告基因表达,并系统调节 tbuT...
Sensors (Basel, Switzerland)
2018
启动子是DNA序列中响应转录因子并启动特定基因表达的小区域。启动子工程生物传感器可通过转录因子识别多胺、糖、内酰胺、氨基酸、有机酸或氧化还原分子,从而激活或抑制基因表达;但相关应用报道较少。本综述介绍了利用人和细菌遗传启动子阵列构建启动子-基因工程生物传感器的策略,并讨论其在高通量筛选(HTS)分子药物、膜蛋白定位与核质穿梭机制研究...
Nature communications
2018
Juárez JF, Lecube-Azpeitia B, Brown SL, Johnston CD 等 5 人
细菌能够感知环境中特定分子并触发相应代谢反应,是重要的生物技术资源。尽管许多介导该过程的转录因子(TF)已被研究,但仅少数被用于分子生物学应用。为扩展具有生物技术价值的生物传感器库,本文提出一种构建和测试嵌合 TF 库的策略,其核心是将高溶解性周质结合蛋白(PBP)与 DNA 结合域(DBD)融合,形成可识别小分子并调控转录的嵌合调...
Applied microbiology and biotechnology
2018
Zhang C, Parrello D, Brown PJB, Wall JD 等 5 人
本研究构建了一种新型铜绿假单胞菌 PAO1 全细胞生物传感器,用于非侵入性、同时监测其体内 las、rhl、pqs 和 iqs 四个群体感应(QS)网络的基因表达。该传感器以 PAO1 为宿主,携带 pSEVA-QSGEF 质粒,将 lasI、rhlI、pqsA 和 ambB 的启动子分别连接 Turbo YFP、mTag BFP2...
Biotechnology journal
2018
Hashi H, Nakamura Y, Ishii J, Kondo A
神经紧张素受体1(NTSR1)是G蛋白偶联受体(GPCR)家族成员,可被神经紧张素肽激活并引发多种生理效应。酿酒酵母是检测人GPCR激动激活的成熟宿主体系。前期研究表明,酵母可功能表达人NTSR1,并利用ZsGreen荧光报告基因检测神经紧张素诱导的信号;但相比表达其他人GPCR(如生长抑素受体)的酵母,NTSR1表达酵母的荧光强度...
Biotechnology and bioengineering
2018
Woolston BM, Roth T, Kohale I, Liu DR 等 5 人
甲醛是常见环境毒素,也是单碳代谢中的关键中间体。监测甲醛浓度对环境监测和天然或合成甲基营养微生物的代谢工程均具有重要意义,但现有方法存在灵敏度低、流程复杂或依赖昂贵分析设备等问题。本文基于大肠杆菌 FrmR 阻遏蛋白及其同源启动子开发了一种甲醛生物传感器。通过优化天然阻遏蛋白结合位点和调控架构,该传感器可检测低至 1 μM 的甲醛。...