Beyond rational-biosensor-guided isolation of 100 independently evolved bacterial strain variants and comparative analysis of their genomes.

BMC biology 2023

与理性代谢工程不同，经典菌株开发长期依赖随机诱变与表型筛选。随着基于生物传感器的荧光激活细胞分选（FACS）策略发展，这类高通量单细胞筛选重新受到重视。本研究将该技术与比较基因组分析结合，用于在谷氨酸棒杆菌 L-组氨酸生产菌株中鉴定促进产物形成的新突变。由于该菌株中已知 L-组氨酸合成相关遗传靶点已被理性改造，新有益突变可能不直观地...

荧光生物传感器 荧光激活细胞分选L-组氨酸谷氨酸棒杆菌比较基因组分析

Targeted mutagenesis and high-throughput screening of diversified gene and promoter libraries for isolating gain-of-function mutations.

Frontiers in bioengineering and biotechnology 2023 Huttanus HM, Triola EH, Velasquez-Guzman JC, Shin SM 等 8 人

本文提出一种用于分离功能获得突变的目标突变与高通量筛选方法。通过重叠延伸聚合酶链式反应（PCR）和含简并碱基的引物，可在启动子或基因的目标区域引入完全随机或受控突变，仅需两轮 PCR 即可构建含 10^4 至 10^7 个变体的组合库。将突变库转入携带合适荧光报告子的全细胞后，可利用荧光激活细胞分选（FACS）快速筛选。经过若干轮正...

综述或非传感器论文 突变库高通量筛选全细胞生物传感器荧光激活细胞分选