International journal of molecular sciences
2024
Ricks NJ, Brachi M, McFadden K, Jadhav RG 等 6 人
苹果酸是柠檬酸循环中的关键中间体,该酶促级联反应是细胞能量代谢的核心,并已被应用于生物燃料电池。为实现苹果酸水平的实时检测,作者通过结构导向突变 Citron 绿色荧光蛋白(GFP)生物传感器的 Cache 结合域,构建了一种基因编码、蛋白基荧光生物传感器 Malon,使其特异性响应苹果酸。Malon 对苹果酸表现出高选择性和荧光激...
eLife
2024
Davidsen K, Marvin JS, Aggarwal A, Brown TA 等 5 人
哺乳动物细胞内天冬氨酸(aspartate, ASP)水平随代谢变化而改变,并影响细胞功能,因此需要稳健工具测量其丰度。现有质谱(MS)方法成本高、通量低且为静态终点测量,难以捕捉动态变化。作者开发了一种基于绿色荧光蛋白(GFP)的天冬氨酸荧光生物传感器 jAspSnFR3,其荧光强度与天冬氨酸浓度相关。作为纯化蛋白,该传感器在天冬...
Protein engineering, design & selection : PEDS
2024
Haloi N, Huang S, Nichols AL, Fine EJ 等 11 人
我们开发了用于尼古丁检测的荧光蛋白传感器,并提高了其灵敏度。在 pH 7.4 下,iNicSnFR12 的 ΔF/F0 对尼古丁浓度的比例常数(δ-slope)为 2.7 μM−1,比先前报道的 iNicSnFR3a 高 6.1 倍。iNicSnFR12 激活态的荧光量子产率至少为 0.6。我们对尼古丁诱导的吸收增强和荧光增强测得相...