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Design Principles for SuCESsFul Biosensors: Specific Fluorophore/Analyte Binding and Minimization of Fluorophore/Scaffold Interactions.

Journal of molecular biology 2016 de Picciotto S, Dickson PM, Traxlmayr MW, Marques BS 等 12 人

量化蛋白在活系统中的位置与浓度对理解其功能至关重要。SuCESsFul(支架偶联环境敏感荧光团)生物传感器将分析物识别与荧光信号转导整合于同一分子,可在高时空分辨率下检测目标蛋白,但其开发长期依赖大量经验筛选。作者系统表征了超过400种由不同蛋白分析物、结合支架和环境敏感荧光团组成的传感器,发现仅少数组合具有大于2倍的荧光动态范围。...

High affinity nucleotide-binding mutant of the ε subunit of thermophilic F1-ATPase.

Biochemical and biophysical research communications 2016 Kato-Yamada Y

ATP 合酶 ε 亚基对 ATP 的高特异性结合及其结合后显著构象变化,已被用于构建活细胞 ATP 荧光生物传感器。现有基于 ε 亚基的传感器亲和力多在毫摩尔至微摩尔范围,难以监测胞外或低浓度 ATP 信号。本研究对嗜热菌 F1-ATPase(TF1)ε 亚基进行定点突变,获得 R103A/R115A 突变体,并通过荧光滴定和动力学...