CRISPR/Cas9-facilitated engineering with growth-coupled and sensor-guided
蛋白工程在开发新代谢途径和优化现有途径中日益重要。传统基因/酶变体库筛选常在非生产菌株或非相关培养条件下进行，未必能选出最适合生产菌株体内使用的最佳酶变体。本文提出一种整合 CRISPR/Cas9 辅助目标基因工程与生长耦合、传感器引导体内筛选（CGSS）的方法，用于蛋白工程和代谢途径优化。作者以芳香氨基酸合成关键酶 3-脱氧-D-...
Engineering ClpS for selective and enhanced N-terminal amino acid binding.
单分子蛋白质测序的核心挑战之一，是对肽链中特定氨基酸进行高保真顺序识别与检测。N端规则通路适配蛋白ClpS可天然识别肽链N端氨基酸（NAA），野生型对N端Phe具有较高特异性但亲和力有限，同时也能识别Trp、Tyr和Leu。本研究采用定向进化方法，筛选对Phe和Trp具有更高亲和力与选择性的ClpS变体。以根癌农杆菌ClpS2为骨架...