Visualization of accessible cholesterol using a GRAM domain-based biosensor.
胆固醇对膜完整性和细胞信号转导至关重要,细胞内胆固醇分布失调与神经退行性疾病等多种疾病相关。可被脂转运蛋白识别并转运的“可及胆固醇”池对维持细胞胆固醇分布和稳态很重要,但活细胞中监测可及胆固醇的工具仍有限。本研究利用进化保守脂转运蛋白 GRAMD1b 的胆固醇感应元件——GRAM 域,工程化出高灵敏可及胆固醇生物传感器 GRAM-W...
胆固醇对膜完整性和细胞信号转导至关重要,细胞内胆固醇分布失调与神经退行性疾病等多种疾病相关。可被脂转运蛋白识别并转运的“可及胆固醇”池对维持细胞胆固醇分布和稳态很重要,但活细胞中监测可及胆固醇的工具仍有限。本研究利用进化保守脂转运蛋白 GRAMD1b 的胆固醇感应元件——GRAM 域,工程化出高灵敏可及胆固醇生物传感器 GRAM-W...
血管内皮细胞(ECs)能感知血流剪切应力,但其机械转导机制仍不清楚。作者此前证明线粒体在剪切应力嘌呤能信号中起直接作用:剪切增加线粒体三磷酸腺苷(ATP)产生,触发 ATP 释放和钙信号。本研究显示,剪切应力可快速降低质膜胆固醇,从而激活线粒体 ATP 产生。利用 domain 4(D4)突变体胆固醇生物传感器成像发现,培养内皮细胞...
本文报道了一种用于单细胞质膜胆固醇检测的胆固醇氧化酶/Triton X-100停泊微电极。传统方法将胆固醇氧化酶固定于微电极表面,通过氧化局部胆固醇外排产生的过氧化氢进行电化学定量,但酶固定后周转率低、信号弱,且难以检测总膜胆固醇。作者将胆固醇氧化酶与1% Triton X-100的磷酸盐缓冲液填充于尖端直径约1 µm的毛细管中,利...